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Cas9穩(wěn)定表達的人卵巢腺癌細胞,;SK-OV-3-Cas9-562價格

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具體成交價以合同協(xié)議為準

產(chǎn)品型號

品       牌ATCC

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2017-01-09 11:26:42瀏覽次數(shù):334次

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Cas9穩(wěn)定表達的人卵巢腺癌細胞;SK-OV-3-Cas9-562價格售后:收到細胞后7天,,如發(fā)現(xiàn)細胞有質(zhì)量問題(如污染,,死亡,快遞運輸?shù)仍颍r,,應(yīng)出具書面質(zhì)量問題報告并及時傳真致銷售人員,,我們將盡快為您解決。

Cas9穩(wěn)定表達的人卵巢腺癌細胞,;SK-OV-3-Cas9-562價格質(zhì)量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC,、ECACC、DSMZ,、JCRB等,,購買到貨后,由我們實驗室擴增,、凍存,,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,,100%進口來源,100%保證5代以內(nèi),,活力>95%,,無細菌、真菌,、支原體污染,。 細胞到達客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,,導(dǎo)致細胞在凍存前死亡,,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。

Cas9穩(wěn)定表達的人卵巢腺癌細胞,;SK-OV-3-Cas9-562價格操作步驟:

1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基,、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),,吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,,使胰酶的量能蓋住細胞,,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,,待貼壁細胞間間隙變大,、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,,晃動細胞瓶,,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,,制成細胞懸液,。控制吹打的力度,,避免產(chǎn)生大量的氣泡,,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng),,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),,1000rpm離心5min,,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,,制成細胞懸液,,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng),。

【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療,。
細胞名稱
形態(tài)特性  上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性  該細胞是采用慢病毒感染的方式使SK-OV-3細胞穩(wěn)定表達Cas9-Flag-Neo,,經(jīng)400ug/mlG418篩選得到的單克隆,經(jīng)Western Blotting驗證該克隆可以表達Cas9蛋白,,可直接用Crispr技術(shù)編輯基因組DNA,。 
培養(yǎng)條件  McCoy's 5A Media (Modified with Tricine)  10%FBS;400ug/ml G418
傳代方法  1:2~1:6傳代,;每周2~3次,。
傳代情況 C3
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR  Amelogenin:x,x;CSF1PO:11,11,;D12S391:22,22,;D13S317:8,11;D16S539:12,12,;D18S51:16,17,18,;D19S433:14,14.2;D21S11:30,31,31.2,;D2S1338:18,23,;D3S1358:14,14;D5S818:11,11,;D6S1043:12,12,;D7S820:13,14;D8S1179:14,15,;FGA:24,26,;Penta E:5,13;TH01:9,9.3,;TPOX:8,11;vWA:17,19,;
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類
細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1,、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%,;二氧化碳,5%,。 溫度:37攝氏度,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3,、凍存液:90%*培養(yǎng)基,,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,。液氮儲存,。
二、細胞處理:
1,、復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,,加入約8ml培養(yǎng)基,,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細胞密度,。
2,、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng),。
對于貼壁細胞,,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
對于懸浮細胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,,可進行細胞凍存,。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,,細胞變圓脫落后,,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存,。懸浮細胞凍存時,,應(yīng)將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,,少量保存上清液(防止細胞吸走),,加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存,。

鎳柱介質(zhì)2mL
90306B-100胰酶消化液 ( 無 EDTA)100mL
130845-50柱式分枝桿菌 RNAout50 次
腦心浸液500g
8- 氧代鳥嘌呤 DNA 糖基化酶80U
DAF-FM DA(NO 熒光探針 )100 次
地高標記 dUTP 溶液25μL
22-0200-5Di-8-ANEPPS5mg
120656-1剪切式勻漿機1臺
葡聚糖 T-200010g
半乳糖氧化酶150U
Spermidine.trihvdrochloride(nNOS 抑制劑 )1g
蝦堿性磷酸酶300U
23-0770-2TLR4 激活劑2mL
80927A-4大提柱式細菌 DNAout4次
RNase-free 水1mL
超微量 ATP 酶測試盒 ( 測 Ca2+ATPase)25 T黑化大家鼠肺成纖維樣細胞英文名稱:NRL1
RL1(大鼠肺成纖維樣細胞)5×106cells/瓶×2
HCC94(人子宮鱗細胞(高分化))5×106cells/瓶×2
BL瓊脂培養(yǎng)基/BL Medium雙岐桿菌分離培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進口
馬丁肉湯1萬毫升/袋國產(chǎn)/進口
HLF-a(人肺細胞)5×106cells/瓶×2
長尾綠猴胚胎細胞英文名稱:4179
人腺細胞英文名稱:HCC1937
泛酸測定培養(yǎng)基/Pantothenic Acid Assay Medium嬰兒食品和粉中泛酸測定250克國產(chǎn)/進口
大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(低分化)英文名稱:PC-12(低分化)
厭氧菌瓊脂/GAM瓊脂/Anaerobic Agar用于梭菌和其他厭氧菌的分離培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進口
P19(小鼠畸胎瘤細胞)5×106cells/瓶×2gersion
NR8383(大鼠肺泡巨噬細胞)5×106cells/瓶×2
FRhK-4(恒河猴胚腎細胞)5×106cells/瓶×2
小鼠肝細胞英文名稱:H22
DG-18瓊脂/Dichloranglycerol Agar食品中霉菌和酵母菌分離培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進口
CaEs-17, 人食管細胞株
HCCLM3(人高轉(zhuǎn)移肝細胞)5×106cells/瓶×2
BGS瓊脂/BGS Agar沙門氏菌分離培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進口
卵磷脂(蛋黃)/蛋黃軟磷脂/磷脂酰膽堿/蛋黃卵磷脂/磷脂蛋黃素/Lecithin from egg yolkBR10克國產(chǎn)/進口
HPAC(人胰腺腺泡上)5×106cells/瓶×2
正常人結(jié)腸組織細胞英文名稱:CCD-18Co
人腺細胞英文名稱:MDA-MB-231
通用洗柱液250mL
凝血酶1000U
18-0140-25超微量 ATP 酶測試盒 (Na+K+、Ca2+Mg2+ATPase)25 T
101211-100DNA  EDTA 2Na100g
Stbl3 感受態(tài)細胞0.1 mL×10
DNA 電泳分子量標準 (200-5000 bp)50 次

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