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Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人乳腺癌細(xì)胞,;231-Cas9-550說明書

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產(chǎn)品型號

品       牌ATCC

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2017-01-07 10:33:54瀏覽次數(shù):364次

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Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人乳腺癌細(xì)胞,;231-Cas9-550說明書采用干冰保存運(yùn)輸。收到細(xì)胞時,若干冰已經(jīng)*融化,,請立即將細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),;若尚留有干冰,請立即將細(xì)胞放入液氮中保存待用,,請按條件貯存細(xì)胞,,切不可將細(xì)胞置于高溫環(huán)境,。

Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人乳腺癌細(xì)胞,;231-Cas9-550說明書現(xiàn)貨直銷,免費(fèi)快遞送貨上門,。公司供應(yīng)各種細(xì)胞株,,細(xì)胞系,種類齊全,,現(xiàn)貨,,質(zhì)量保證,公司所有產(chǎn)品僅供科研使用,,不得用于醫(yī)學(xué)診斷,。使用前仔細(xì)閱讀本說明書

產(chǎn)品名稱Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人乳腺癌細(xì)胞,;231-Cas9-550說明書
用途僅用科研
保存條件4℃保存一年;-20℃長期保存

細(xì)胞名稱
形態(tài)特性  上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性  該細(xì)胞是采用慢病毒感染的方式使MDA-MB-231細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)Cas9-Flag-Puromycin,,經(jīng)2ug/ml嘌呤霉素篩選得到的單克隆,經(jīng)Western Blotting驗(yàn)證該克隆可以表達(dá)Cas9蛋白,,可直接用Crispr技術(shù)編輯基因組DNA,。 
培養(yǎng)條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS;2ug/ml Puromycin
傳代方法  1:2~1:4傳代,;每周2~3次,。
傳代情況 C3
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR  Amelogenin:x,x;CSF1PO:12,13,;D12S391:17,18,;D13S317:13,13;D16S539:12,12,;D18S51:11,16,;D19S433:11,14;D21S11:30,33.2,;D2S1338:20,21,;D3S1358:16,16;D5S818:12,12,;D6S1043:18,18,;D7S820:8,9;D8S1179:13,13;FGA:22,23,;Penta E:11,11,;TH01:7,9.3;TPOX:8,9,;vWA:15,18,;
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類
運(yùn)輸保存:
采用干冰保存運(yùn)輸。收到細(xì)胞時,,若干冰已經(jīng)*融化,,請立即將細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng);若尚留有干冰,,請立即將細(xì)胞放入液氮中保存待用,,請按條件貯存細(xì)胞,切不可將細(xì)胞置于高溫環(huán)境,。
保存條件:4℃保存一年;-20℃長期保存
用途:只可用于科研,。
儲存:液氮。
運(yùn)輸:干冰(第二代培養(yǎng)末期液氮凍存),。
細(xì)胞一般2-3天更換一次培養(yǎng)基,,這取決于細(xì)胞生長的速度。許多細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室通常在周一,,周三,,周五更換培養(yǎng)基。
注意:*次植入后,,在6-16小時內(nèi)更換培養(yǎng)基,,以去除殘留的二甲基亞楓和死亡細(xì)胞。到達(dá)客戶手中,,出現(xiàn)任何問題(人為或者非人為),,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次,。對于細(xì)胞的真實(shí)性,,支持客戶檢測對應(yīng)的biomarker,(如證明細(xì)胞錯誤,,全額退款,。)公司針對每株細(xì)胞,鑒定gene background,,鑒定完成的細(xì)胞可以提供數(shù)據(jù),,用于證明細(xì)胞的真實(shí)性,并且?guī)椭蛻舾嗟牧私饧?xì)胞特性,。
操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中,,將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片,,待細(xì)胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,,4%的多聚甲醛固定爬片15min,,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min,。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,,使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),,PBS沖洗3次,每次3min,。
5. 封閉血清室溫孵育20min,,PBS沖洗3次,,每次3min,。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,,于4°C濕盒中孵育一夜,,PBS沖洗3次,每次3min,。
7. 二抗孵育:選與一抗對應(yīng)的二抗,,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,,PBS沖洗3次,,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,,顯微鏡下觀察,當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色,。
9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍(lán),。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側(cè),,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),,以免產(chǎn)生氣泡,,封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察,。牛血清白蛋白標(biāo)準(zhǔn)品,,2mg/mL1mL
Calcein M 100mg
非凍型血液 DNA 保存液250mL
Protein G 瓊脂糖1mL
120505-500Dam 甲基轉(zhuǎn)移酶500U
130997-10Sephadex G50 介質(zhì)10mL
TCEP 鹽酸膦1g
電泳 TEMED1.5mL
TBE 電泳液 ,10×250mL
DNA 修復(fù)混合液 30 次
131090-10中性親和素蛋白10mg
130605-50即用型多重 PCR 試劑盒50 次
脫氧核糖核酸酶 ( 牛胰 )25mg
放線酮溶液 ,100mg/mL1mL
甲叉雙丙烯酰胺25g
M13mp18DNA10μg
CAS11096-37-0apo- 轉(zhuǎn)鐵蛋白10mg
120515-20即用型藍(lán)白 T 載體 E 型 ( 無啟動子,無 MCS)20 次
嘌呤5g
固藍(lán) RR 鹽5g
金胺 O5gDL-TryptophanDL-色氨酸1954/12/6
NAPHTHENIC ACID SODIUM SALT環(huán)烷酸61790-13-4
DL-3-AMINOBUTYRIC ACIDDL-3-氨基丁酸541-48-0
Standard solution for the verification of ICP-OESICP光譜儀檢定溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)
Allopurinol別嘌醇315-30-0
2-Aminobenzotrifluoride2-氨基三88-17-5
L-Epinephrine hydrochloride酸腎上腺素55-31-2
Disodium phosphate dodecahydrate磷酸氫二,十二水10039-32-4
2,6-DIBROMOBENZALDEHYDE2,6-二溴67713-23-9
1-Cyclohexene-1-carboxylic acid環(huán)己酸636-82-8
2-Ethylhexylamine2-乙基己胺104-75-6
Nitroate cellulose sheets酸纖維素薄膜
N-Benzyl-4-piperidoneN-芐基啶3612-20-2
N-NITROSOMORPHOLINEN-亞基啉59-89-2
Stearic acid硬脂酸1957/11/4
5-Fluoroindole5-吲哚399-52-0
(TRIISOPROPYLSILYL)ACETYLENE三異丙基硅基乙炔89343-06-6
1,2,4-Triazolo[4,3-a]pyridin-3(2H)-one吡啶三唑6969-71-7
Methyl L-prolinate hydrochlorideL-脯氨酸酯酸2133-40-6
Cyclobutanol環(huán)丁醇2919-23-5
2-Methoxy-4-nitroaniline2-氧基-4-基胺97-52-9
P-AMINOBENZAMIDE GLYCINE對氨基酰甘氨酸
MANGANESE(II) ACETYLACETONATE乙酰丙錳(II)14024-58-9

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