Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人乳腺癌細(xì)胞；MCF7-Cas9-544*操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中,，將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片,，待細(xì)胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,，4%的多聚甲醛固定爬片15min,，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min,。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min,，使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫）,，PBS沖洗3次，每次3min,。
5. 封閉血清室溫孵育20min,，PBS沖洗3次，每次3min,。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜,，PBS沖洗3次,，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應(yīng)的二抗,，按比例稀釋后滴加在爬片上,，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min,。
8. 將爬片周圍水漬吸干,，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察,，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色,。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化,，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍(lán),。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上,，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干,。
11. 鏡檢觀察,。

Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人乳腺癌細(xì)胞；MCF7-Cas9-544*現(xiàn)貨直銷,，免費快遞送貨上門,。公司供應(yīng)各種細(xì)胞株，細(xì)胞系,，種類齊全,，現(xiàn)貨，質(zhì)量保證,，公司所有產(chǎn)品僅供科研使用,，不得用于醫(yī)學(xué)診斷。使用前仔細(xì)閱讀本說明書,。

細(xì)胞名稱
形態(tài)特性  上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性  該細(xì)胞是采用慢病毒感染的方式使MCF7細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)Cas9-Flag-Puromycin,，經(jīng)2ug/ml嘌呤霉素篩選得到的單克隆，經(jīng)Western Blotting驗證該克隆可以表達(dá)Cas9蛋白,，可直接用Crispr技術(shù)編輯基因組DNA,。 
培養(yǎng)條件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS；2ug/ml Puromycin
傳代方法  1:3~1:6傳代,；每周2~3次。
傳代情況 C3
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法（-）
STR  Amelogenin：x,x,；CSF1PO：10,10,；D12S391：18,20；D13S317：11,11,；D16S539：11,12,；D18S51：14,14；D19S433：13,14；D21S11：30,30,；D2S1338：21,23,；D3S1358：16,16；D5S818：11,12,；D6S1043：12,18,；D7S820：8,9；D8S1179：10,14,；FGA：23,25,；Penta E：7,12；TH01：6,6,；TPOX：9,12,；vWA：14,15
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類
運輸保存：
采用干冰保存運輸。收到細(xì)胞時,，若干冰已經(jīng)*融化,，請立即將細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)；若尚留有干冰,，請立即將細(xì)胞放入液氮中保存待用,，請按條件貯存細(xì)胞，切不可將細(xì)胞置于高溫環(huán)境,。
保存條件：4℃保存一年;-20℃長期保存
用途：只可用于科研,。
儲存：液氮。
運輸：干冰(第二代培養(yǎng)末期液氮凍存),。
細(xì)胞一般2-3天更換一次培養(yǎng)基,，這取決于細(xì)胞生長的速度。許多細(xì)胞培養(yǎng)實驗室通常在周一,，周三,，周五更換培養(yǎng)基。
注意：*次植入后,，在6-16小時內(nèi)更換培養(yǎng)基,，以去除殘留的二甲基亞楓和死亡細(xì)胞。到達(dá)客戶手中,，出現(xiàn)任何問題（人為或者非人為）,，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費再向客戶提供一次,。對于細(xì)胞的真實性,，支持客戶檢測對應(yīng)的biomarker，（如證明細(xì)胞錯誤,，全額退款,。）公司針對每株細(xì)胞,，鑒定gene background，鑒定完成的細(xì)胞可以提供數(shù)據(jù),，用于證明細(xì)胞的真實性,，并且?guī)椭蛻舾嗟牧私饧?xì)胞特性。

12-253Stb13 菌種1mL
一步法大提質(zhì)粒 DNAout5次
肌球蛋白100mg
甲基橙5g
考馬斯亮藍(lán) G-25010g
CAS68-94-0次黃嘌呤1g
80807A-50動物細(xì)胞裂解液 A50mL
熒光染色細(xì)胞凋亡檢測試劑盒200 次
聚乙烯醇100g
D- 甘露醇250g
TMB 法生物素雜交試劑盒5次
CAS91079-38-8牛肉蛋白胨500g
131122-10考馬斯亮藍(lán) R-25010g
豬膽鹽25g
Lillie 甲醛中性固定液250 mL3-Chloro-2-methylaniline3--2-基胺87-60-5
Phthaloyl amlodipine鄰二?；钡仄?8150-62-3
2-Ami,3,5-triazine2-氨基-1,3,5-三嗪4122/4/7
Z-ASP(OTBU)-OSUN-芐氧羰基-L-天冬氨酸 4-叔丁酯 1-(N-琥珀酰亞胺)酯3338-32-7
N,N,N',N'-Tetramethylchloroformamidinium hexafluorophosphateN,N,N',N'-四基脒六磷酸94790-35-9
TRIMETHYL(PENTAFLUOROPHENYL)SILANE三基五基硅烷1206-46-8
Acorus gramineus, ext.石菖蒲油91745-11-8
6,7,8-TRIMETHOXYCOUMARIN白蠟樹素6035-49-0
Dihexadecyldimethylammonium bromide雙十六烷基二基溴化銨70755-47-4
TITANIUM OXYSULFATE硫酸氧鈦123334-00-9
FMOC-D-ALA-WANG RESINFMOC-D-ALA-WANG RESIN
N-(tert-Butyldimethylsilyl)-N-methyl-trifluoroacetamideN-(特丁基二基硅)-N-基三乙酰胺77377-52-7
ASTRAGALIN紫云英甙480-10-4
Methyl 1,2,4-triazole-3-carboxylate1,2,4-三氮唑-3-羧酸酯4928-88-5
12-Crown-412-冠-4294-93-9
Zinc nitrate hexahydrate六水酸鋅10196-18-6
2-Sulfobenzoic anhydride2-磺基酸酐1981/8/3
Methyl trifluoromethanesulfonate三烷磺酸酯333-27-7
TRIMYRISTIN甘油三肉豆蔻酸酯555-45-3
1,2-Bis(triethoxysilyl)ethane1,2-二(三乙氧基硅基)乙烷16068-37-4
1-TETRADECANESULFONIC ACID SODIUM SALT十四烷基硫酸6994-45-2
Bispyribac-sodium雙草125401-92-5
Platinum dioxide無水氧化鉑1314-15-4
Cuprous bromide溴化亞銅7787-70-4
L- 乳酸脫氫酶 ( 兔肌 )2.5ku
活/死細(xì)胞染色試劑盒（Calcein AM·PI）1000 次
CAS7365-44-8N- 三 ( 羥甲基 ) 甲基 -2- 氨基乙烷磺酸5g
130877-1可逆性銅染試劑盒1套
α-Tubulin 小鼠單抗1000μL