詳細(xì)介紹
人膠質(zhì)瘤細(xì)胞,;GOS-3圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療,。
細(xì)胞名稱 人膠質(zhì)瘤細(xì)胞,;GOS-3圖片
形態(tài)特性 多角
生長特性 貼壁生長
特征特性 由U-343MG衍生而來
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS + 4mM L-Glu
傳代方法 1:3傳代;3~4天1次,。
傳代情況
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:X,,Y,; CSF1PO:10,12,; D13S317:9,,13; D16S539:9,,12,; D18S51:23; D19S433:11.2,,13,,14; D21S11:31,,33.2,; D2S1338:22,24,; D3S1358:15,,17; D5S818:12,,13,; D7S820:9,11,; D8S1179:13,,14; FGA:19,,20,; TH01:6,9.3,; TPOX:8,,9; vWA:17,,18,;
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),,90%,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%,。
2,、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%,;二氧化碳,,5%,。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3,、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配,。液氮儲(chǔ)存。
二,、細(xì)胞處理:
1,、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,,培養(yǎng)),。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2,、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
對于懸浮細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3,、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),,應(yīng)將細(xì)胞收集,,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),,加入部分新鮮培養(yǎng)基,,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存,。
質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC,、ECACC、DSMZ,、JCRB等,,購買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增,、凍存,,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進(jìn)口來源,,100%保證5代以內(nèi),,活力>95%,無細(xì)菌,、真菌,、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基,、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,,加少量PBS潤洗細(xì)胞,,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,,37℃孵育,,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大,、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,,終止胰酶作用,,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液,。控制吹打的力度,,避免產(chǎn)生大量的氣泡,,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng),,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),,1000rpm離心5min,,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,,用吸管小心吹散沉淀,,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),,加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng)。
140623-20雙染細(xì)胞凋亡檢測試劑盒(Annexin V-EGFP·PI)20 次
90602D-50DNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) (3)λDNA/EcoR I50 次
濕潤劑 P-40100mL
丁酰膽堿酯酶500U
溴甲酚紫5g
DNA HEPES( 羥乙基乙硫磺酸 )100g
CAS103476-89-7亮抑酶肽2mg
130537-10鈣蛋白酶抑制劑Ⅰ溶液,,10mg/mL10mL
柱式海洋動(dòng)物 DNAout50 次
MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶10000U
ApaI2000U
微量 DNA 助沉劑0.1mL
柱式探針純化試劑盒10 次
130552-500堿性磷酸酶,,偶聯(lián)500U
131042-25miRNA 熒光定量檢測試劑盒25 次
Vinblastine( 長春新堿 )100μL
果膠酶100mgTETRAETHYLSILANE四乙基硅烷631-36-7
C.I. Solvent Yellow 90溶劑黃90
AMENTOFLAVONE穗花杉雙黃1617-53-4
ACID GREEN 3酸性綠34680-78-8
NA水質(zhì)氮氧化物(水劑)標(biāo)樣
NA水質(zhì)總磷標(biāo)樣
4-Bromophthalimide4-溴鄰二酰亞胺6941-75-9
Epmedin B羊藿定 B110623-73-9
Loperamide hydrochloride酸洛丁胺34552-83-5
NICKEL(II) SULFATE HEPTAHYDRATE硫酸鎳10101-98-1
Bis[2-(2-benzothiazoly)phenolato]zinc(II)雙[2-(2-并噻唑基)酚]鋅58280-31-2
NA卟啉顯色劑
Hypericin金絲桃素548-04-9
Ethyl methyl carbonate碳酸乙酯623-53-0
2,5-Dimethyl-3-hexyne-2,5-diol2,5-二基-3-己炔-2,5-二醇142-30-3
Isobutyl iodide碘代異丁烷513-38-2
Hexafluorozirconic acid六鋯酸12021-95-3
Isobutyl isobutyrate異丁酸異丁酯97-85-8
3-Amino-4-chlorobenzamide3-氨基-4-酰胺19694-10-1
YTTRIUM NITRATE HEXAHYDRATE酸釔13494-98-9
Molybdenyl acetylacetonate乙酰丙鉬17524-05-9
FLUORIDE STANDARD離子(F-)標(biāo)準(zhǔn)溶液16984-48-8
D-(+)-TURANOSED(+)-松二糖547-25-1
L- 胱氨酸25g
牛血清白蛋白封堵液250mL
CAS25988-63-0多聚 -L- 賴氨酸 (3-7 萬 )25mg
130527-1哺乳動(dòng)物蛋白酶抑制劑1mL