紅色熒光蛋白標記人結(jié)直腸癌細胞,；HCT116-RFP*操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中,，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片,。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min,，再次用PBS浸洗玻片3次,，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min,，使細胞通透,。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫）,，PBS沖洗3次,，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,，PBS沖洗3次,，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,，滴加在爬片上,，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次,，每次3min,。
7. 二抗孵育：選與一抗對應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上,，37°C濕盒中孵育30min,，PBS沖洗3次,，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,，顯微鏡下觀察，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色,。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍,。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè),，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),，以免產(chǎn)生氣泡,，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察,。

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細胞名稱
形態(tài)特性  上皮樣,；多角形
生長特性 貼壁生長
特征特性  RFP穩(wěn)定表達 
培養(yǎng)條件  IMDM: Iscove's Modiefied Dulbecco's Medium  10%FBS
傳代方法  1:3傳代,；3~4天1次。
傳代情況 
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法（-）
STR 
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類
運輸保存：
采用干冰保存運輸,。收到細胞時,，若干冰已經(jīng)*融化，請立即將細胞復(fù)蘇培養(yǎng),；若尚留有干冰,，請立即將細胞放入液氮中保存待用，請按條件貯存細胞,，切不可將細胞置于高溫環(huán)境,。
保存條件：4℃保存一年;-20℃長期保存
用途：只可用于科研。
儲存：液氮,。
運輸：干冰(第二代培養(yǎng)末期液氮凍存),。
細胞一般2-3天更換一次培養(yǎng)基,，這取決于細胞生長的速度。許多細胞培養(yǎng)實驗室通常在周一,，周三,，周五更換培養(yǎng)基。
注意：*次植入后,，在6-16小時內(nèi)更換培養(yǎng)基,，以去除殘留的二甲基亞楓和死亡細胞。到達客戶手中,，出現(xiàn)任何問題（人為或者非人為）,，導(dǎo)致細胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費再向客戶提供一次,。對于細胞的真實性,，支持客戶檢測對應(yīng)的biomarker，（如證明細胞錯誤,，全額退款,。）公司針對每株細胞，鑒定gene background,，鑒定完成的細胞可以提供數(shù)據(jù),，用于證明細胞的真實性，并且?guī)椭蛻舾嗟牧私饧毎匦浴?/p>

CAS13453-07-1氯化金1g
120683-1羧芐青霉素溶液 ,50mg/mL1mL
乙醇脫氫酶1.5ku
酵母產(chǎn)孢培養(yǎng)基100mL
碘5g
Sulfolobus DNA 聚合酶 IV100U
CAS1476-53-5新生霉素250mg
130589-100小鼠抗 Tag-100 標簽蛋白單抗100μL
植物種屬鑒定 PCR Mix 4100 次
L- 山梨糖5g
L- 山梨糖5g
PCNA 小鼠單抗1000 μL
CAS26628-22-8疊氮25g
81205-30一站式 Tricine-SDS-PAGE 套裝30 次
轉(zhuǎn) Lectin 基因植物 PCR Mix100 次
卵磷脂 ( 大豆 )25g
離析酶 R-101g6-Aminoquinoline6-氨基喹啉580-15-4
4'-Methoxyresveratrol白藜蘆醇-4'-33626-08-3
Oxindole2-吲哚59-48-3
ALLURA RED AC誘紅25956-17-6
Hemin化血紅素16009-13-5
5-Acetylsalicylamide5-乙?；畻铛０?0187-51-7
Nitroterephthalic acid2-基對二酸610-29-7
9-Chloroacridine9-吖啶1207-69-8
L-Arginine ethyl ester dihydrochlorideL-精氨酸乙酯酸36589-29-4
Mesitylene1,3,5-三108-67-8
N-(3-Aminopropyl)-imidazole1-(3-氨基丙基)咪唑5036-48-6
Isopropenylboronic acid pinacol ester異丙基酸頻哪醇酯126726-62-3
2-Phenylacetophenone二乙451-40-1
Acid Yellow 23肼黃1934-21-0
Aluminum diacetate hydroxide式乙酸鋁142-03-0
Diphenyldimethoxysilane二基二氧基硅烷6843-66-9
1-Acetyl-2-imidazolidinoneN-乙?；?2-咪唑烷5391-39-9
3-CHLORO-4-HYDROXYBENZOIC ACID3--4-羥基酸半,水合3964-58-7
N'-Cbz-L-ornithineN'-Cbz-L-鳥氨酸3304-51-6
1-UNDECANETHIOL1-十一（烷）硫醇5332-52-5
N-OCTYLTRICHLOROSILANE基三硅烷5283-66-9
2-Fluoro-4-(trifluoromethyl)aniline2--4-三基胺69409-98-9
9-methoxycamptothecin9-氧基喜樹19685-10-0
DEOXYRIBONUCLEIC ACID, GENOMIC小牛胸腺DNA91080-16-9
超微量 ATP 酶測試盒 ( 測 Ca2+ATPase)25 T
CAS9001-18-7心肌黃酶1KU
131154-0.1山羊抗小鼠 IgG，熒光素 488 標記0.1mg
131176-30免 RNA 提取 FFPE RT-PCR 試劑盒30 次
N- 乙酰 -L- 半胱氨酸5g