詳細(xì)介紹
人急性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞(白介素21基因修飾),;THP-1/IL21價(jià)格質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC,、DSMZ,、JCRB等,購(gòu)買到貨后,,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增,、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測(cè),,100%進(jìn)口來源,,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,,無細(xì)菌,、真菌、支原體污染,。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次,。
人急性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞(白介素21基因修飾);THP-1/IL21價(jià)格操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基,、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,,37℃孵育,,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大,、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,,終止胰酶作用,,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),,加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況,。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),,1000rpm離心5min,棄去上清,,加入新鮮的培養(yǎng)基,,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),,加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),。
【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,,不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性 圓形,;淋巴母細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 懸浮生長(zhǎng)
特征特性 IL-21穩(wěn)定表達(dá)
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 維持細(xì)胞濃度在2~4×105~8×105/ml,,勿超過1×106/ml;2~3天換液1次,。
傳代情況
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:X; CSF1PO:10,; D12S391:23,; D13S317:8; D16S539:11,12,; D18S51:15,16,; D19S433:14,14.2; D21S11:29,30,; D2S1338:16,17,; D3S1358:16; D5S818:12,; D6S1043:11,15,; D7S820:9,11; D8S1179:12,; FGA:21,24,; Penta E:5,14; TH01:9.3; TPOX:8,9,; vWA:16,;
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),,90%,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%,。
2,、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%,;二氧化碳,,5%。 溫度:37攝氏度,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存,。
二,、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,,培養(yǎng)),。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2,、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺(tái),,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3,、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),,應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),,加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存,。
Carnoy 固定液250 mL
高 GC DNA 清除劑,PCR 1.5mL
苯基介質(zhì)50mL
131102-5生物素化兔 IgG5mg
130987D-5接頭 DNA(Sal I-Sma I)5nmol
小鼠單核細(xì)胞分離液 1.090200mL
即用型封堵液 (NC ) 50mL
臺(tái)盼藍(lán)5g
ApaI2000U
CAS72-57-1臺(tái)盼藍(lán)5g
100878-100Western 印跡膜封膜液 ( 尼龍膜 )100mL
φ29 DNA 聚合酶250U
MgSO4溶液,,10mM,,PCR 5mL
10 μL RNase-free 白吸頭 ( 袋裝 )1000 支
總谷胱甘肽過氧化物酶檢測(cè)試劑盒100 次
高效 E.coli 感受態(tài)細(xì)胞制備試劑盒20 次
140588-250Verhoeff 固定液250 mL
130977-5生物素標(biāo)記的 Oligo(dT)5μg
凝血酶1000U
ADP/ATP 發(fā)光法細(xì)胞活力檢測(cè)試劑盒200 次
Mito-Tracker Green( 線粒體綠色熒光探針 )50μL
線狀 DNA 清除劑30 次2,5-Dichloro-3-methylthiophene2,5-二-3-基噻吩17249-90-0
Chloral hydrate三乙,,水合302-17-0
Isoimperatorin異歐前胡素482-45-1
Phenethyl acetate乙酸乙酯103-45-7
ALCIAN BLUE 8GX阿利新藍(lán)8GX75881-23-1
(+)-5-Iodo-2'-deoxyuridine5-碘-2'-脫氧尿苷54-42-2
Methyl Red Voges Proskauer BrothMR-VP培養(yǎng)基
Chloro(1,5-cyclooctadiene)rhodium(I) dimer(1,5-環(huán)二)銠(I)二聚體12092-47-6
TRIISOBUTYLPHOSPHINE異丁基磷化氫4125-25-1
Acetone丙67-64-1
Sodium benzoate酸532-32-1
RICINOLEIC ACID蓖麻油酸141-22-0
4-Bromobenzoic acid對(duì)溴酸586-76-5
4-Aminobenzotrifluoride對(duì)三基胺455-14-1
(S)-(+)-2,2,2-TRIFLUORO-1-(9-ANTHRYL)ETHANOL三-1-(9-蒽基)乙醇60646-30-2
1,4-Cyclohexanedione1,4-環(huán)己二637-88-7
Fmoc-L-glutamic acid-gamma-benzyl esterFmoc-L-谷氨酸-gamma-芐酯123639-61-2
Magnesium chloride hexahydrate化鎂,六水7791-18-6
4-Nitrophenyl diphenylamine4-基基4316-57-8
Florfenicol SodiuM Succinate尼考琥珀酸