人乳腺癌細(xì)胞（穩(wěn)轉(zhuǎn)pTet-on質(zhì)粒）；MDA-MB-231-B2*操作步驟：
1. 將無(wú)菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中，將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片,，待細(xì)胞長(zhǎng)至80%時(shí)取出爬片,。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min,，再次用PBS浸洗玻片3次,，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min,，使細(xì)胞通透,。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過(guò)氧化氫）,，PBS沖洗3次,，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,，PBS沖洗3次,，每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育：按照抗體說(shuō)明書(shū)稀釋比例稀釋好一抗,，滴加在爬片上,，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次,，每次3min,。
7. 二抗孵育：選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上,，37°C濕盒中孵育30min,，PBS沖洗3次，每次3min,。
8. 將爬片周?chē)疂n吸干,，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察,，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽(yáng)性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色,。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化,，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍(lán),。
10. 封片：將中性樹(shù)膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上,，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干,。
11. 鏡檢觀察,。

人乳腺癌細(xì)胞（穩(wěn)轉(zhuǎn)pTet-on質(zhì)粒）,；MDA-MB-231-B2*現(xiàn)貨直銷(xiāo)，免費(fèi)快遞送貨上門(mén),。公司供應(yīng)各種細(xì)胞株,，細(xì)胞系，種類(lèi)齊全,，現(xiàn)貨,，質(zhì)量保證，公司所有產(chǎn)品僅供科研使用,，不得用于醫(yī)學(xué)診斷,。使用前仔細(xì)閱讀本說(shuō)明書(shū)。

細(xì)胞名稱(chēng)
形態(tài)特性  上皮樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性  穩(wěn)定轉(zhuǎn)染pTet-on質(zhì)粒,，表達(dá)rtTA,、Neo，受Dox誘導(dǎo)倍數(shù)為20,。 
培養(yǎng)條件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS + 400ug/ml G418
傳代方法 
傳代情況 
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法（-）
STR  Amelogenin：X,；CSF1PO：12，13,；D13S317：13,；D16S539：12；D18S51：11,，16,；D19S433：11，14,；D21S11：30,，33.2；D2S1338：20,，21,；D3S1358：16；D5S818：12,；D7S820：8,，9；D8S1179：13,；FGA：22,，23；TH01：7,，9.3,；TPOX：8，9,；vWA：15,，18,；
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類(lèi)
運(yùn)輸保存：
采用干冰保存運(yùn)輸。收到細(xì)胞時(shí),，若干冰已經(jīng)*融化,，請(qǐng)立即將細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),；若尚留有干冰,，請(qǐng)立即將細(xì)胞放入液氮中保存待用，請(qǐng)按條件貯存細(xì)胞,，切不可將細(xì)胞置于高溫環(huán)境,。
保存條件：4℃保存一年;-20℃長(zhǎng)期保存
用途：只可用于科研。
儲(chǔ)存：液氮,。
運(yùn)輸：干冰(第二代培養(yǎng)末期液氮凍存),。
細(xì)胞一般2-3天更換一次培養(yǎng)基，這取決于細(xì)胞生長(zhǎng)的速度,。許多細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室通常在周一,，周三，周五更換培養(yǎng)基,。
注意：*次植入后,，在6-16小時(shí)內(nèi)更換培養(yǎng)基，以去除殘留的二甲基亞楓和死亡細(xì)胞,。到達(dá)客戶(hù)手中,，出現(xiàn)任何問(wèn)題（人為或者非人為），導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶(hù)提供一次,。對(duì)于細(xì)胞的真實(shí)性，支持客戶(hù)檢測(cè)對(duì)應(yīng)的biomarker,，（如證明細(xì)胞錯(cuò)誤,，全額退款。）公司針對(duì)每株細(xì)胞,，鑒定gene background,，鑒定完成的細(xì)胞可以提供數(shù)據(jù)，用于證明細(xì)胞的真實(shí)性,，并且?guī)椭蛻?hù)更多的了解細(xì)胞特性,。

柱式動(dòng)物線粒體 DNAout，PCR 50 次
一管式雙鏈 cDNA 合成試劑盒10 次
90502-200AMV 逆轉(zhuǎn)錄酶200U
90603A-5隨機(jī)引物法 DNA 探針標(biāo)記試劑盒5次
T4 噬菌體基因 32 蛋白100μg 
蛋白質(zhì)電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) (14.4-97.4KD)20 次
離心管 ( 配研磨杵用 ) 1000 只
小鼠 RFP 標(biāo)簽單抗1000μL
130873-300TEV 蛋白酶300U
131140-40雙脫氧 dNTP 套裝40uL×4
透明質(zhì)酸100mg
F12 培養(yǎng)基100mL
硼酸500g
低熔點(diǎn)瓊脂糖5g
CAS9031-72-5 乙醇脫氫酶1.5ku
131130E-100真菌種屬鑒定 PCR Mix 5100 次
細(xì)胞株系列--
高效農(nóng)桿菌感受態(tài)細(xì)胞制備試劑盒20 次Acetylpyrazine2-乙?；拎?2047-25-2
2-Methylindoline2-基吲哚啉6872/6/6
FREUND'S COMPLETE ADJUVANT弗氏*佐劑9007-81-2
Xanthone占噸90-47-1
Fmoc-N-methyl-L-isoleucineFmoc-N-基-L-異亮氨酸138775-22-1
1-TRIDECA-十三醇112-70-9
2,4-DIBROMO-6-(TRIFLUOROMETHYL)ANILINE2-氨基-3,5-二溴三71757-14-7
3-METHYLINDAN-1-ONE3-基-1-茚6072-57-7
3,3'-DIFLUOROBENZOPHENONE3,3'-二二345-70-0
Spermine精胺71-44-3
tert-Butylisocyanate叔丁基異酸酯1609-86-5
2-(4-Bromophenyl)ethylamine4-溴乙胺73918-56-6
DECAMETHYLTETRASILOXANE十基四硅氧烷141-62-8
Notoginsenoside Ft1三七皂苷Ft1
L-HomoserineL-高絲氨酸672-15-1
2,3,5,6-TETRAMETHYL-1,4-PHENYLENEDIAMINE四基對(duì)3102-87-2
3-(ACRYLOYLOXY)PROPYLTRIMETHOXYSILANE3-丙氧丙基三氧基硅4369-14-6
Tetradecylthioacetic acid十四烷基硫代乙酸2921-20-2
griffonin紫草苷63492-69-3
Cyclopropanecarbonitrile環(huán)丙基5500-21-0
γ- 環(huán)狀糊精25mg
預(yù)混型丙烯酰胺 - 甲叉雙丙烯干粉 (19:1)100g
CAS538-75-0N,N,- 二環(huán)已基碳化二亞胺25g
12-157JM109 菌種1mL