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人乳腺癌細(xì)胞(穩(wěn)轉(zhuǎn)pTet-on質(zhì)粒),;MDA-MB-231-B2*

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更新時間:2017-01-07 09:43:38瀏覽次數(shù):354

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,,謝謝!

產(chǎn)品簡介

人乳腺癌細(xì)胞(穩(wěn)轉(zhuǎn)pTet-on質(zhì)粒),;MDA-MB-231-B2*采用干冰保存運輸,。收到細(xì)胞時,若干冰已經(jīng)*融化,,請立即將細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng);若尚留有干冰,,請立即將細(xì)胞放入液氮中保存待用,,請按條件貯存細(xì)胞,切不可將細(xì)胞置于高溫環(huán)境,。

詳細(xì)介紹

人乳腺癌細(xì)胞(穩(wěn)轉(zhuǎn)pTet-on質(zhì)粒),;MDA-MB-231-B2*操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中,將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片,,待細(xì)胞長至80%時取出爬片,。
2. 用PBS浸洗爬片3次,,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,,每次3min,。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細(xì)胞通透,。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,,每次3min,。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,,每次3min,。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,,于4°C濕盒中孵育一夜,,PBS沖洗3次,每次3min,。
7. 二抗孵育:選與一抗對應(yīng)的二抗,,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,,PBS沖洗3次,,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,,顯微鏡下觀察,當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色,。
9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍(lán),。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側(cè),,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),,以免產(chǎn)生氣泡,,封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察,。

人乳腺癌細(xì)胞(穩(wěn)轉(zhuǎn)pTet-on質(zhì)粒),;MDA-MB-231-B2*現(xiàn)貨直銷,免費快遞送貨上門,。公司供應(yīng)各種細(xì)胞株,,細(xì)胞系,,種類齊全,現(xiàn)貨,,質(zhì)量保證,,公司所有產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于醫(yī)學(xué)診斷,。使用前仔細(xì)閱讀本說明書,。

產(chǎn)品名稱
用途僅用科研
保存條件4℃保存一年;-20℃長期保存

細(xì)胞名稱
形態(tài)特性  上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性  穩(wěn)定轉(zhuǎn)染pTet-on質(zhì)粒,表達(dá)rtTA,、Neo,,受Dox誘導(dǎo)倍數(shù)為20。 
培養(yǎng)條件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS + 400ug/ml G418
傳代方法 
傳代情況 
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR  Amelogenin:X,;CSF1PO:12,,13;D13S317:13,;D16S539:12,;D18S51:11,16,;D19S433:11,,14;D21S11:30,,33.2,;D2S1338:20,21,;D3S1358:16,;D5S818:12;D7S820:8,,9,;D8S1179:13;FGA:22,,23,;TH01:7,9.3,;TPOX:8,,9;vWA:15,,18;
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類
運輸保存:
采用干冰保存運輸,。收到細(xì)胞時,,若干冰已經(jīng)*融化,,請立即將細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng);若尚留有干冰,,請立即將細(xì)胞放入液氮中保存待用,,請按條件貯存細(xì)胞,切不可將細(xì)胞置于高溫環(huán)境,。
保存條件:4℃保存一年;-20℃長期保存
用途:只可用于科研,。
儲存:液氮。
運輸:干冰(第二代培養(yǎng)末期液氮凍存),。
細(xì)胞一般2-3天更換一次培養(yǎng)基,,這取決于細(xì)胞生長的速度。許多細(xì)胞培養(yǎng)實驗室通常在周一,,周三,,周五更換培養(yǎng)基。
注意:*次植入后,,在6-16小時內(nèi)更換培養(yǎng)基,,以去除殘留的二甲基亞楓和死亡細(xì)胞。到達(dá)客戶手中,,出現(xiàn)任何問題(人為或者非人為),,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次,。對于細(xì)胞的真實性,,支持客戶檢測對應(yīng)的biomarker,(如證明細(xì)胞錯誤,,全額退款,。)公司針對每株細(xì)胞,鑒定gene background,,鑒定完成的細(xì)胞可以提供數(shù)據(jù),,用于證明細(xì)胞的真實性,并且?guī)椭蛻舾嗟牧私饧?xì)胞特性,。

柱式動物線粒體 DNAout,,PCR 50 次
一管式雙鏈 cDNA 合成試劑盒10 次
90502-200AMV 逆轉(zhuǎn)錄酶200U
90603A-5隨機(jī)引物法 DNA 探針標(biāo)記試劑盒5次
T4 噬菌體基因 32 蛋白100μg 
蛋白質(zhì)電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) (14.4-97.4KD)20 次
離心管 ( 配研磨杵用 ) 1000 只
小鼠 RFP 標(biāo)簽單抗1000μL
130873-300TEV 蛋白酶300U
131140-40雙脫氧 dNTP 套裝40uL×4
透明質(zhì)酸100mg
F12 培養(yǎng)基100mL
硼酸500g
低熔點瓊脂糖5g
CAS9031-72-5 乙醇脫氫酶1.5ku
131130E-100真菌種屬鑒定 PCR Mix 5100 次
細(xì)胞株系列--
高效農(nóng)桿菌感受態(tài)細(xì)胞制備試劑盒20 次Acetylpyrazine2-乙酰基吡嗪22047-25-2
2-Methylindoline2-基吲哚啉6872/6/6
FREUND'S COMPLETE ADJUVANT弗氏*佐劑9007-81-2
Xanthone占噸90-47-1
Fmoc-N-methyl-L-isoleucineFmoc-N-基-L-異亮氨酸138775-22-1
1-TRIDECA-十三醇112-70-9
2,4-DIBROMO-6-(TRIFLUOROMETHYL)ANILINE2-氨基-3,5-二溴三71757-14-7
3-METHYLINDAN-1-ONE3-基-1-茚6072-57-7
3,3'-DIFLUOROBENZOPHENONE3,3'-二二345-70-0
Spermine精胺71-44-3
tert-Butylisocyanate叔丁基異酸酯1609-86-5
2-(4-Bromophenyl)ethylamine4-溴乙胺73918-56-6
DECAMETHYLTETRASILOXANE十基四硅氧烷141-62-8
Notoginsenoside Ft1三七皂苷Ft1
L-HomoserineL-高絲氨酸672-15-1
2,3,5,6-TETRAMETHYL-1,4-PHENYLENEDIAMINE四基對3102-87-2
3-(ACRYLOYLOXY)PROPYLTRIMETHOXYSILANE3-丙氧丙基三氧基硅4369-14-6
Tetradecylthioacetic acid十四烷基硫代乙酸2921-20-2
griffonin紫草苷63492-69-3
Cyclopropanecarbonitrile環(huán)丙基5500-21-0
γ- 環(huán)狀糊精25mg
預(yù)混型丙烯酰胺 - 甲叉雙丙烯干粉 (19:1)100g
CAS538-75-0N,N,- 二環(huán)已基碳化二亞胺25g
12-157JM109 菌種1mL

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