綠色熒光蛋白標記人結(jié)直腸癌細胞,；HCT116-GFP*操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片,，待細胞長至80%時取出爬片,。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min,，再次用PBS浸洗玻片3次,，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min,，使細胞通透,。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫）,，PBS沖洗3次,，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,，PBS沖洗3次,，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,，滴加在爬片上,，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次,，每次3min,。
7. 二抗孵育：選與一抗對應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上,，37°C濕盒中孵育30min,，PBS沖洗3次，每次3min,。
8. 將爬片周圍水漬吸干,，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察,，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色,。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min,，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍,。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè),，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),，以免產(chǎn)生氣泡,，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察,。

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細胞名稱
形態(tài)特性  上皮樣,；多角形
生長特性 貼壁生長
特征特性  GFP穩(wěn)定表達 
培養(yǎng)條件  IMDM: Iscove's Modiefied Dulbecco's Medium  10%FBS,；200ug/ml G418
傳代方法  1:3傳代；3~4天1次,。
傳代情況 
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法（-）
STR  Amelogenin：X,，Y；CSF1PO：7,，10,；D13S317：10，12,；D16S539：11,，13；D18S51：16,，17,；D19S433：12，13,；D21S11：29,，30；D2S1338：16,；D3S1358：12,，18,，19；D5S818：10,，11；D7S820：11,，12,；D8S1179：12，14,；FGA：18,，23；TH01：8,，9,；TPOX：8；vWA：17,，22,；
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類
運輸保存：
采用干冰保存運輸。收到細胞時,，若干冰已經(jīng)*融化,，請立即將細胞復蘇培養(yǎng)；若尚留有干冰,，請立即將細胞放入液氮中保存待用,，請按條件貯存細胞，切不可將細胞置于高溫環(huán)境,。
保存條件：4℃保存一年;-20℃長期保存
用途：只可用于科研,。
儲存：液氮。
運輸：干冰(第二代培養(yǎng)末期液氮凍存),。
細胞一般2-3天更換一次培養(yǎng)基,，這取決于細胞生長的速度。許多細胞培養(yǎng)實驗室通常在周一,，周三,，周五更換培養(yǎng)基。
注意：*次植入后,，在6-16小時內(nèi)更換培養(yǎng)基,，以去除殘留的二甲基亞楓和死亡細胞。到達客戶手中,，出現(xiàn)任何問題（人為或者非人為）,，導致細胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費再向客戶提供一次,。對于細胞的真實性,，支持客戶檢測對應(yīng)的biomarker,，（如證明細胞錯誤，全額退款,。）公司針對每株細胞,，鑒定gene background，鑒定完成的細胞可以提供數(shù)據(jù),，用于證明細胞的真實性,，并且?guī)椭蛻舾嗟牧私饧毎匦浴?/p>

Southern 血液 DNAout10 次
DL- 蘋果酸100g
免質(zhì)粒提取篩選試劑盒1000 次
DB3.1 菌種1mL
130407-1克必隆 eTS cDNA 文庫構(gòu)建試劑盒1套
90212-100高載量 PCR 片段純化試劑盒100 次
水飽和正丁醇10mL
大鼠內(nèi)皮細胞分離液 1.066200mL
雙染細胞凋亡檢測試劑盒（Annexin V-FITC·PI）50 次
抑氨肽酶，5mg/mL5mL
17-0080HindIII2000U
100848-5ECL 法地高雜交檢測試劑盒5次
Tubulin-Tracker Red( 微管紅色熒光探針 )40μL
對苯醌固定液250 mL
TdT 加尾法 DNA 標記試劑盒5次
RecA 蛋白200μg 
D013-1動植物種屬鑒定1 個樣
130694-25m7G(5´)ppp(5´)G 帽結(jié)構(gòu)類似物25 OD
胃蛋白酶250mg
G(5´)ppp(5´)A 帽結(jié)構(gòu)類似物25 ODETHYLLITHIUM乙基鋰811-49-4
Black currant extrac加侖提取物
Swertiamarine獐牙菜苦甙17388-39-5
1-NAPHTHYLAMINE-3,6,8-TRISULFONIC ACID DISODIUM SALT HYDRATE8-氨基1,3,6-萘三磺酸二5398-34-5
Nickel oxide三氧化二鎳1314-06-3
1,2-Dibromopropane1,2-二溴丙烷78-75-1
Bullatine B雪上一枝蒿乙素466-26-2
Dimethyl isophthalate間二酸二酯1459-93-4
Diisooctyl sebacate癸二酸二異酯27214-90-0
ISOPROPYLMAGNESIUM BROMIDE異丙基溴化鎂920-39-8
1,2,5,6,9,10-Hexabromocyclododecane六溴環(huán)十二烷3194-55-6
2-CYANOETHYLTRIETHOXYSILANE3-三乙氧硅基919-31-3
Furfuryl acetate乙酸糠酯623-17-6
N,N-DIETHYL-P-PHENYLENEDIAMINE MONOHYDROCHLORIDEN,N-二乙基對酸2198-58-5
Lanthanum(III) nitrate hexahydrate酸鑭10277-43-7
4-NITROPHENYL-ALPHA-D-GLUCOPYRANOSIDE對基-α-D-葡萄糖吡喃苷3767-28-0
1-Naphthylacetamide1-萘乙酰胺86-86-2
6-Hydroxy-2-naphthoic acid6-羥基-2-萘酸16712-64-4
2-(Trifluoromethoxy)aniline鄰氨基三氧基1535-75-7