詳細(xì)介紹
人肺腺癌細(xì)胞,;SPC-A1圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療,。
細(xì)胞名稱 人肺腺癌細(xì)胞,;SPC-A1圖片
形態(tài)特性 上皮細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 STR檢測(cè)發(fā)現(xiàn)該細(xì)胞可能被HeLa細(xì)胞污染。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法
傳代情況 C2
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:X,;CSF1PO:9,,10;D13S317:12,,13.3,;D16S539:9,10,;D18S51:16,;D19S433:13,14,;D21S11:27,,28;D2S1338:17,;D3S1358:15,,18;D5S818:11,,12,;D7S820:8,12,;D8S1179:12,;FGA:21;TH01:7,;TPOX:8,,12;vWA:16,,18,;
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%,。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%,;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存,。
二,、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,,培養(yǎng)),。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2,、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3,、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),,應(yīng)將細(xì)胞收集,,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),,加入部分新鮮培養(yǎng)基,,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存,。
質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC,、ECACC、DSMZ,、JCRB等,,購(gòu)買(mǎi)到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增,、凍存,,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè),100%進(jìn)口來(lái)源,,100%保證5代以內(nèi),,活力>95%,無(wú)細(xì)菌,、真菌,、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題,,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次,。
操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基,、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),,吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量胰酶,,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,,待貼壁細(xì)胞間間隙變大,、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,,制成細(xì)胞懸液,。控制吹打的力度,,避免產(chǎn)生大量的氣泡,,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng),,隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),,1000rpm離心5min,,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,,用吸管小心吹散沉淀,,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),,加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng)。
真菌種屬鑒定 PCR Mix 5100 次
CAS92-32-0吡啰紅 G5g
131119-200HRP 穩(wěn)定劑 / 稀釋劑200mL
140466A-100酚 - 混合液 (RNA 提取 )100mL
Origami(DE3) 菌種1mL
CCK-8 細(xì)胞增殖及毒性檢測(cè)試劑盒5mL
軟骨 RNAout50 次
RNA 溶解液10mL
D016-1克隆技術(shù)服務(wù)一個(gè)蛋白
81024-10DH5α 化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞0.1mL×10
小鼠抗 GST 標(biāo)簽單抗1000μL
即用型熒光定量 PCR 試劑盒100 次
氯化100g
EcoRV1500U
超快蛋白銀染試劑盒1000mL
23-0090-2BAY11-7082(NF-κB 抑制劑 )2mg
60607-100液相內(nèi)毒素清除劑100 次Lobetyolin黨參炔苷136085-37-5
cis-3-Hexenyl benzoate酸葉醇酯25152-85-6
Sodium dodecyl sulfate十二烷基硫酸151-21-3
1-Bromobutane溴正丁烷109-65-9
NAGVPC瓊脂平板(9cm)
Povidone iodine聚乙吡咯烷碘絡(luò)合物25655-41-8
1,3-Bis(diphenylphosphino)propane1,3-雙(二膦基)丙烷6737-42-4
NA層析聚酰胺樹(shù)脂
Sodium borohydride氫化16940-66-2
NA伊紅次基蘭
Glycolic acid乙醇酸79-14-1
L-GLUTAMIC ACID GAMMA-(BETA-NAPHTHYLAMIDE)N-(L-谷氨?;?-β-萘胺14525-44-1
Barium boron oxide偏酸鋇13701-59-2
Tetrahydrothiophen-3-one四氫噻吩-3-1003-04-9
Fmoc-S-acetamidomethyl-L-cysteineFMOC-S-乙酰氨基-L-半胱氨酸86060-81-3
D-LYXOSED(-)-來(lái)蘇糖1114-34-7
Bis(acetylacetonato)cobalt乙酰丙鈷(II)14024-48-7
Haloxyfop-etotyl吡禾靈87237-48-7
Tocopheryl acetate生育酚乙酸酯7695-91-2
4-(2-PYRIDYLAZO)RESORCINOL MONOSODIUM SALT HYDRATE4-(2-吡啶偶氮)間二酚16593-81-0
Tributyl(vinyl)tin三丁基乙基錫7486-35-3
1-Bromopentane1-溴烷110-53-2
(-)-Dibenzoyl-L-tartaric acid monohydra-(-)-二酰酒石酸一水物62708-56-9
2,3,6-TRICHLOROPHENOL2,3,6-三酚933-75-5
DL-ALANYL-DL-NORVALINEDL-丙氨酰-DL-正纈氨酸2325-18-0
乳酸測(cè)試盒 ( 測(cè)血清,、組織等 )48 T
DNA 上樣液 ( 藍(lán) ),6×10mL
DNA 75% 乙醇250mL
TEV 蛋白酶300U
140310-10DMEM( 低糖 )10L
130886-50植物線粒體總蛋白提取試劑盒50 次