詳細介紹
人肝癌細胞,;Hep3b價格質(zhì)量保證:
我們的細胞株來源于ATCC,、ECACC、DSMZ,、JCRB等,,購買到貨后,由我們實驗室擴增,、凍存,,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進口來源,,100%保證5代以內(nèi),,活力>95%,,無細菌、真菌,、支原體污染,。 細胞到達客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,,導(dǎo)致細胞在凍存前死亡,,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
人肝癌細胞,;Hep3b價格操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基,、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),,吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,,加少量PBS潤洗細胞,,加入適量胰酶,,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,,每隔2~3min顯微鏡下觀察,,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,,加入新鮮培養(yǎng)基,,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,,用吸管小心吹打貼壁的細胞,,制成細胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),,加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況,。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),,1000rpm離心5min,棄去上清,,加入新鮮的培養(yǎng)基,,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),,加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,,不可用于臨床診斷和治療,。
細胞名稱
形態(tài)特性 上皮細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 Hep-3b細胞建系于1979年,源自一位患有肝癌的7歲黑人男童,。該細胞產(chǎn)生甲胎蛋白(alpha-fetoprotein),、乙肝表面抗原(BHsAg) 、白蛋白,、巨球蛋白,、α- 抗胰蛋白酶(alphal-antitrypsin)、轉(zhuǎn)鐵蛋白,、補體(C3),、C3活性載體,纖維原等,,具有廣泛的研究價值,。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:4~1:6傳代,每周換液2次
傳代情況 C2
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:X,;CSF1PO:8,;D13S317:12,14,;D16S539:10,;D18S51:20;D19S433:12.2,,14,;D21S11:30,31,;D2S1338:21,,25;D3S1358:15,,OL,;D5S818:13;D7S820:8,,10,;D8S1179:12;FGA:18,;TH01:6,,7;TPOX:9,;vWA:17,;
同工酶
染色體 60~82
使用權(quán)限 A類
細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1,、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%。
2,、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%;二氧化碳,,5%,。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3,、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配,。液氮儲存。
二,、細胞處理:
1,、復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,,培養(yǎng)),。第二天換液并檢查細胞密度。
2,、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3,、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存,。貼壁細胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,,應(yīng)將細胞收集,,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),,加入部分新鮮培養(yǎng)基,,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存,。
T7 核酸內(nèi)切酶 I250U
CAS58-85-5D- 生物素 ( 維生素 H)1g
12-267GS190 酵母菌種1mL
一管式植物 DNAout500 次
可溶性兩性霉素 B25mg
葡聚糖 T-50010g
HAT 篩選培養(yǎng)基500mL
尼龍膜,,13×20cm1張
140634-500MTS 細胞增殖與細胞毒性檢測試劑盒500 次
70503Z-50DNA 電泳分子量標準 (300-10000 bp)50 次
生物素化的堿性磷酸酶 (AP)1mg
淀粉樣 β- 蛋白片段 25-35250μg
丙酮酸25g
NP-40 裂解液100mL
CAS5989-81-1α- 乳糖100g
130543-25α2巨球蛋白25Inh.U
柱式分枝桿菌 RNAout50 次
miRNA 尿素 -PAGE 上樣液 ,6×10mL
Aminoally-dUTP 溶液,10mM100μLDL-2-AMINOOCTANOIC ACID2-氨基酸2187/7/7
4-N-OCTYLOXYBENZALDEHYDE4-氧基24083-13-4
N-Methyl pyrrole1-基吡咯96-54-8
N-Acetylsulfanilyl chloride對乙酰胺基磺酰121-60-8
Trityl azide疊氮化三基烷14309-25-2
3-METHYLCYCLOHEXANONE3-基環(huán)己591-24-2
6-CARBOXYFLUORESCEIN DIACETATE6-羧基熒光素二乙酸酯3348/3/6
4-ACETAMIDOCYCLOHEXANOL4-乙酰氨基環(huán)己醇23363-88-4
4-Hydroxyquinoline4-羥基喹啉611-36-9
METHYL 4-HYDROXY-3-IODOBENZOATE4-羥基-3-碘酸酯15126-06-4
2-ACETYLCYCLOHEXANONE2-乙?;h(huán)己874-23-7
SILVER DIETHYLDITHIOCARBAMATE砷試劑1470-61-7
1,3-Dichloro-2-propa,3-二丙醇96-23-1
5-Hydroxyindole5-羥基吲哚1953-54-4
6-Methyl-1-indanone6-基-1-茚24623-20-9
2-Benzothiazolol2-羥基并噻唑934-34-9
Boc-D-aspartic acid 4-benzyl ester叔丁氧羰基-D-天冬氨酸 4-芐酯51186-58-4
2,2,4-Trimethyl-1,3-pentanediolmono(2-methylpropanoate)2,2,4-三基-1,3-二醇單異丁酸酯25265-77-4
2,3-Dichlorothiophene-5-sulfonamide2,3-二噻吩-5-磺酰胺256353-34-1
Southernwood Oil蒿油
benzoylmesaconine酰新烏頭原63238-67-5
O-[2-ACETAMIDO-2-DEOXY-D-GLUCOPYRANOSYLI(1Z)-2-(乙?;被?-2-脫氧-N-[[(基氨基)羰基]氧基]-D-葡萄糖酸肟 DELTA-內(nèi)酯132489-69-1
p-Toluenethiol對硫酚106-45-6