詳細(xì)介紹
人肺腺癌瘤株,;Calu-3價(jià)格質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC,、DSMZ,、JCRB等,,購(gòu)買(mǎi)到貨后,,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè),,100%進(jìn)口來(lái)源,,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,,無(wú)細(xì)菌,、真菌、支原體污染,。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次,。
人肺腺癌瘤株;Calu-3價(jià)格操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基,、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,,37℃孵育,,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大,、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,,終止胰酶作用,,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液,??刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡,,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),,加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),,隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況,。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,,棄去上清,,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,,制成細(xì)胞懸液,,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),,加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),。
【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,,不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱(chēng)
形態(tài)特性 實(shí)體瘤
生長(zhǎng)特性 體內(nèi)生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞來(lái)源患者已經(jīng)用環(huán)磷酰胺,、博來(lái)霉素,、阿霉素進(jìn)行過(guò)治療。利用培養(yǎng)的細(xì)胞系,,進(jìn)行裸鼠體內(nèi)移植,,形成實(shí)體瘤,凍存,,可用于建立人肺腺癌的體內(nèi)移植模型,。
培養(yǎng)條件 -
傳代方法 制備成細(xì)胞懸液接種至免疫缺陷小鼠。
傳代情況 P1
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法(-)
STR -
同工酶
染色體 -
使用權(quán)限 A類(lèi)
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1,、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%,。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%,;二氧化碳,5%,。 溫度:37攝氏度,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3,、凍存液:90%*培養(yǎng)基,,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,。液氮儲(chǔ)存,。
二、細(xì)胞處理:
1,、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2,、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,,1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,,將剩余細(xì)胞懸起,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3,、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存,。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),,應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),,加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存,。
dNTP 溶液 ( 標(biāo)記 )0.5mL
131279-250戊二醛二甲酸緩沖固定液250 mL
90203-50沉淀法 miRNA 分離試劑盒50 次
尿嘧啶5g
96 孔板病毒 RNAout( 離心法 )5次
DiOC6(3) 碘化物100mg
電泳 MOPS100g
22-0310-1Fluo-3,五銨鹽1mg
90315-100非凍型尿液 DNA 保存液100mL
葡萄糖 -6- 磷酸二500mg
鼻腔采樣拭子 50 支
基因列表--
DNA 拓?fù)洚悩?gòu)酶 I100U
120893-200大鼠 NK 細(xì)胞分離液 1.068200mL
71205-50柱式土壤 DNAout50 次
Rosetta(DE3)plysS 菌種1mLCERIUM(III) TRIFLUOROMETHANESULFONATE三烷磺酸鈰76089-77-5
FMOC-PHE(4-F)-WANG RESINFMOC-PHE(4-F)-WANG RESIN
Alkyl (C12-C14) glycidyl ether縮水甘油 12-14 烷基68609-97-2
LOGANIC ACID馬錢(qián)苷酸22255-40-9
Isobutylnitrite亞酸異丁酯542-56-3
2-BROMOTHIOPHENOL2-溴硫醇6320/2/1
Tetrabromothiophene四溴噻吩3958-03-0
TRANS-2-HEXENAL2-已6728-26-3
Oridonin冬凌草素28957-04-2
1-BUTYL-3-METHYLIMIDAZOLIUM METHANESULFONATE1-丁基-3-基咪唑磺酸342789-81-5
L-(-)-SORBOSEL-山梨糖87-79-6
1,1,2-Trichlorotrifluoroethane1,1,2-三三乙烷76-13-1
Diphenylthiocarbazide二氨基硫脲622-03-7
L(+)-Gulonic acid gamma-lactoneL-古洛糖酸-γ-內(nèi)酯1128-23-0
O,O-DIETHYL THIOPHOSPHATE, POTASSIUM SALTO,O-二乙基硫代磷酸鉀5871-17-0
TERT-BUTYL N-(2-HYDROXYETHYL)CARBAMATEN-(叔丁氧羰基)乙醇胺26690-80-2
Mesna美司那19767-45-4
CI 37085固紅TR半化鋅89453-69-0
D-3-TRIFLUOROMETHYLPHENYLALANINED-3-三基丙氨酸14464-67-6
DL-Cysteine hydrochloride monohydrateDL-半胱氨酸酸,一水96998-61-7
NA甘露低聚糖
AMBERLITE IR-120Amberlite? IR-120陽(yáng)離子交換樹(shù)脂(型)9002-23-7
Methyl thiobutyrate硫代丁酸酯2432-51-1
潮霉素 B 干粉250mg
液相內(nèi)毒素清除劑500 次
大鼠中性粒細(xì)胞分離液 1.091200mL
18-0250-24鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶測(cè)試盒24 T