詳細(xì)介紹
人惡性黑色素瘤瘤株;A-375 [A375]圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,,不可用于臨床診斷和治療,。
細(xì)胞名稱 人惡性黑色素瘤瘤株;A-375 [A375]圖片
形態(tài)特性 實體瘤
生長特性 體內(nèi)生長
特征特性 利用培養(yǎng)的細(xì)胞系,,進行裸鼠體內(nèi)移植,,形成實體瘤,凍存,,可用于建立人黑色素瘤的體內(nèi)移植模型,。
培養(yǎng)條件 -
傳代方法 制備成細(xì)胞懸液接種至免疫缺陷小鼠成瘤。
傳代情況 C1
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR -
同工酶
染色體 -
使用權(quán)限 A類
人惡性黑色素瘤瘤株,;A-375 [A375]圖片細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1,、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%,。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%,;二氧化碳,5%,。 溫度:37攝氏度,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3,、凍存液:90%*培養(yǎng)基,,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,。液氮儲存,。
二、細(xì)胞處理:
1,、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,,加入約8ml培養(yǎng)基,,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2,、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng),。
對于貼壁細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,,1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,,將剩余細(xì)胞懸起,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3,、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,,可進行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,,再添加10%DMSO后進行凍存,。懸浮細(xì)胞凍存時,應(yīng)將細(xì)胞收集,,1000RPM條件下離心4分鐘,,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,,加入到凍存管中,,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
人惡性黑色素瘤瘤株,;A-375 [A375]圖片質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC,、ECACC、DSMZ,、JCRB等,,購買到貨后,由我們實驗室擴增,、凍存,,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進口來源,,100%保證5代以內(nèi),,活力>95%,,無細(xì)菌、真菌,、支原體污染,。 細(xì)胞到達客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
人惡性黑色素瘤瘤株,;A-375 [A375]圖片操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基,、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),,吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,,加少量PBS潤洗細(xì)胞,加入適量胰酶,,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,,待貼壁細(xì)胞間間隙變大,、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,,晃動細(xì)胞瓶,,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,,制成細(xì)胞懸液,。控制吹打的力度,,避免產(chǎn)生大量的氣泡,,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng),,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),,1000rpm離心5min,,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),,加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng)。
DNA 洗脫液10mL
即用型熒光定量 PCR 試劑盒600 次
可逆性鋅染試劑盒1套
CAS25952-53-8乙基二甲基胺丙基碳化二亞胺1g
130883-50磷酸化蛋白純化試劑盒50 次
Zinquin 乙酯5mg
鏈霉菌 PCR Mix 6100 次
1000 μL RNase-free 藍吸頭 ( 袋裝 )1000 支
Zinquin 乙酯5mg
β- 瓊脂糖酶Ⅰ500U
18-0670-48游離脂肪酸測試盒48 T
80915B-100超雜交液 B(含甲酰胺)100mL
TE 緩沖液,,PH7.010mL
非凍型細(xì)菌 RNA 保存液100mL
硼氫化氰5g
HRP 標(biāo)記的抗地高抗體10μL
CAS92-71-72,5- 二苯基惡唑5g
12-219Tuner(DE3)plysS 菌種1mL
一步式胞漿蛋白微量制備試劑盒30 次Niobium oxide化二鈮1313-96-8
Chlorocyclohexane代環(huán)己烷542-18-7
METHYSTICIN麻醉椒苦素495-85-2
Ethyl 4-bromobutyrate4-溴丁酸乙酯2969-81-5
TRIS(2,4,6-TRIMETHOXYPHENYL)PHOSPHINE三(2,4,6 -三氧基基)膦91608-15-0
Kanamycin sulfate硫酸卡那霉素25389-94-0
ALPHA,ALPHA,ALPHA',ALPHA'-TETRABROMO-M-XYLENE間-雙溴基36323-28-1
2-Amino-3,5-dichlorobenzonitrile2-氨基-3,5-二36764-94-0
2-Amino-3-pyridinecarboxaldehyde2-氨基-3-吡啶7521-41-7
Chlorodiphenylphosphine代二基膦1079-66-9
Pyruvic acid丙酸127-17-3
Carnauba wax棕櫚蠟8015-86-9
NO3--N in Water酸氮標(biāo)準(zhǔn)溶液
(L-3-TRANS-CARBOXYOXIRANE-2-CARBONYL)-L-LEUCYLAGMATINE HEMIHYDRATEN-(反式-環(huán)氧丁二?;?-L-亮氨酸-4-胍基丁基酰胺66701-25-5
人惡性黑色素瘤瘤株;A-375 [A375]圖片X-PHOS2-二環(huán)己基磷-2',4',6'-三異丙基聯(lián)564483-18-7
Cianidanol兒茶素154-23-4
RONGALITE吊白塊149-44-0
2,6-Dinitrobenzaldehyde2,6-二基606-31-5
METHYLTRIOXORHENIUM(VII)基三氧化錸70197-13-6
4-BROMOBUTYRYL CHLORIDE4-溴丁酰927-58-2
Nitrocellulose lacquer thinner香蕉水
Calcium formate酸鈣544-17-2