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人惡性黑色素瘤瘤株,;A-375 [A375]圖片【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 人惡性黑色素瘤瘤株,;A-375 [A375]圖片
形態(tài)特性 實體瘤
生長特性 體內生長
特征特性 利用培養(yǎng)的細胞系,,進行裸鼠體內移植,形成實體瘤,,凍存,,可用于建立人黑色素瘤的體內移植模型。
培養(yǎng)條件 -
傳代方法 制備成細胞懸液接種至免疫缺陷小鼠成瘤,。
傳代情況 C1
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR -
同工酶
染色體 -
使用權限 A類
人惡性黑色素瘤瘤株,;A-375 [A375]圖片細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),,90%,;優(yōu)質胎牛血清,10%,。
2,、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%,;二氧化碳,,5%。 溫度:37攝氏度,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,,現用現配,。液氮儲存。
二,、細胞處理:
1,、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或將細胞懸液加入10cm皿中,,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)),。第二天換液并檢查細胞密度,。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng),。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,,1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,,棄去半數培養(yǎng)基后,,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3,、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存,。貼壁細胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,,應將細胞收集,,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),,加入部分新鮮培養(yǎng)基,,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存,。
人惡性黑色素瘤瘤株,;A-375 [A375]圖片質量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC,、DSMZ,、JCRB等,購買到貨后,,由我們實驗室擴增,、凍存,凍存的產品全部經過QC檢測,,100%進口來源,,100%保證5代以內,活力>95%,,無細菌,、真菌、支原體污染,。 細胞到達客戶手中,,1個月內出現任何問題,導致細胞在凍存前死亡,,我們公司都可以免費再向客戶提供一次,。
人惡性黑色素瘤瘤株,;A-375 [A375]圖片操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞,,加入適量胰酶,,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,,每隔2~3min顯微鏡下觀察,,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,,加入新鮮培養(yǎng)基,,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,,用吸管小心吹打貼壁的細胞,,制成細胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,,加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況,。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,,1000rpm離心5min,棄去上清,,加入新鮮的培養(yǎng)基,,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,,加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),。
DNA 洗脫液10mL
即用型熒光定量 PCR 試劑盒600 次
可逆性鋅染試劑盒1套
CAS25952-53-8乙基二甲基胺丙基碳化二亞胺1g
130883-50磷酸化蛋白純化試劑盒50 次
Zinquin 乙酯5mg
鏈霉菌 PCR Mix 6100 次
1000 μL RNase-free 藍吸頭 ( 袋裝 )1000 支
Zinquin 乙酯5mg
β- 瓊脂糖酶Ⅰ500U
18-0670-48游離脂肪酸測試盒48 T
80915B-100超雜交液 B(含甲酰胺)100mL
TE 緩沖液,,PH7.010mL
非凍型細菌 RNA 保存液100mL
硼氫化氰5g
HRP 標記的抗地高抗體10μL
CAS92-71-72,5- 二苯基惡唑5g
12-219Tuner(DE3)plysS 菌種1mL
一步式胞漿蛋白微量制備試劑盒30 次Niobium oxide化二鈮1313-96-8
Chlorocyclohexane代環(huán)己烷542-18-7
METHYSTICIN麻醉椒苦素495-85-2
Ethyl 4-bromobutyrate4-溴丁酸乙酯2969-81-5
TRIS(2,4,6-TRIMETHOXYPHENYL)PHOSPHINE三(2,4,6 -三氧基基)膦91608-15-0
Kanamycin sulfate硫酸卡那霉素25389-94-0
ALPHA,ALPHA,ALPHA',ALPHA'-TETRABROMO-M-XYLENE間-雙溴基36323-28-1
2-Amino-3,5-dichlorobenzonitrile2-氨基-3,5-二36764-94-0
2-Amino-3-pyridinecarboxaldehyde2-氨基-3-吡啶7521-41-7
Chlorodiphenylphosphine代二基膦1079-66-9
Pyruvic acid丙酸127-17-3
Carnauba wax棕櫚蠟8015-86-9
NO3--N in Water酸氮標準溶液
(L-3-TRANS-CARBOXYOXIRANE-2-CARBONYL)-L-LEUCYLAGMATINE HEMIHYDRATEN-(反式-環(huán)氧丁二酰基)-L-亮氨酸-4-胍基丁基酰胺66701-25-5
人惡性黑色素瘤瘤株,;A-375 [A375]圖片X-PHOS2-二環(huán)己基磷-2',4',6'-三異丙基聯(lián)564483-18-7
Cianidanol兒茶素154-23-4
RONGALITE吊白塊149-44-0
2,6-Dinitrobenzaldehyde2,6-二基606-31-5
METHYLTRIOXORHENIUM(VII)基三氧化錸70197-13-6
4-BROMOBUTYRYL CHLORIDE4-溴丁酰927-58-2
Nitrocellulose lacquer thinner香蕉水
Calcium formate酸鈣544-17-2
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