詳細介紹
人低分化肺腺癌細胞;SK-LU-1圖片【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,,不可用于臨床診斷和治療,。
細胞名稱 人低分化肺腺癌細胞;SK-LU-1圖片
形態(tài)特性 上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞系源于一位60歲的白人女性患者的肺腺癌組織,。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS,;1%NEAA, 1mM丙酮酸鈉
傳代方法 1:2傳代;每周換液2次,。
傳代情況 P58
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:X,;CSF1PO:10;D13S317:10,;D16S539:8,;D18S51:18,;D19S433:15;D21S11:29,,30,,30.2;D2S1338:16,,17,;D3S1358:18;D5S818:11,;D7S820:9,;D8S1179:10;FGA:21,,22,;TH01:7;TPOX:8,,10,;vWA:16,17,;
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1,、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%。
2,、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%;二氧化碳,,5%,。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3,、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配,。液氮儲存。
二,、細胞處理:
1,、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,,加入約8ml培養(yǎng)基,,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細胞密度,。
2,、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng),。
對于貼壁細胞,,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3,、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存,。貼壁細胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,,再添加10%DMSO后進行凍存,。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,,1000RPM條件下離心4分鐘,,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,,加入到凍存管中,,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
質(zhì)量保證:
我們的細胞株來源于ATCC,、ECACC,、DSMZ、JCRB等,,購買到貨后,,由我們實驗室擴增、凍存,,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,,100%進口來源,100%保證5代以內(nèi),,活力>95%,,無細菌、真菌,、支原體污染,。 細胞到達客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,,導致細胞在凍存前死亡,,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基,、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預熱,,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,,加少量PBS潤洗細胞,,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,,37℃孵育,,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,,加入新鮮培養(yǎng)基,,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,,用吸管小心吹打貼壁的細胞,,制成細胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),,加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況,。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),,1000rpm離心5min,棄去上清,,加入新鮮的培養(yǎng)基,,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),,加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),。
IPTG 溶液,,200mg/mL1.5mL
Bsu DNA 聚合酶,大片段200U
140438-500腦心浸液500g
12-263Y1090 菌種1mL
一管式 TMB 顯色液 A( 可溶型 ) 100mL
抗酒石酸酸性磷酸酶檢測試劑盒120 次
聚乙烯吡咯烷酮 40000100g
真空抽濾盒1套
CAS9036-19-5曲拉通 X-114100mL
81207-20半干法電轉(zhuǎn)液 ( 干粉 )20L
λ 噬菌體 DNAout50 次
MgCl2溶液,,25mM,,PCR 5mL
1.5 mL RNase-free 離心管500 支LITHIUM NIOBATE鈮酸鋰12031-63-9
2,6-Dichloroaniline2,6-608-31-1
PINORESINOL DIGLUCOSIDE(P)(PLEASE CALL)松脂醇二葡萄糖苷63902-38-5
4-CHLORO-6-ETHYL-2-PYRIMIDINAMINE2-氨基-4--6-乙基嘧啶5734-67-8
Nickel(II) acetate tetrahydrate乙酸鎳6018-89-9
Trifluorothymine5-三基尿嘧啶54-20-6
alpha,alpha-Diphenyl-4-piperidinomethanolα,α-二基-4-啶醇115-46-8
Dioscin薯蕷皂甙19057-60-4
Bis-(3-phthalyl anhydride) ether4,4′-聯(lián)二酐1823-59-2
Chlorophenol Red酚紅4430-20-0
2,7-Dibromonaphthalene2,7-二溴萘58556-75-5
2-Chlorobenzonitrile鄰873-32-5
Ethyl oxalyl monochloride草酰單乙酯4755-77-5
Pyridoxamine dihydrochloride吡哆胺二酸524-36-7
Aluminum oxide氧化鋁1344-28-1
2,6-Dichlorotoluene2,6-二118-69-4
Alkaline Peptone Water性蛋白胨水
4-Amino-m-cresol4-氨基-3-基酚2835-99-6
DL-TryptophanDL-色氨酸1954/12/6
NAPHTHENIC ACID SODIUM SALT環(huán)烷酸61790-13-4
總 SOD 活性檢測試劑盒 (WST 法 )100 次
超快轉(zhuǎn)染試劑盒1mL
131290-250PLPD 固定液250 mL
130976-100Oligo(dT) 再生溶液100mL