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產(chǎn)品型號(hào)
品 牌ATCC
廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
所 在 地上海市
更新時(shí)間:2017-01-07 08:03:42瀏覽次數(shù):388次
聯(lián)系我時(shí),,請(qǐng)告知來(lái)自 化工儀器網(wǎng)人膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞,;T-24價(jià)格
人神經(jīng)母細(xì)胞瘤,;SH-SY5Y說(shuō)明書
綠色熒光蛋白標(biāo)記人宮頸癌細(xì)胞,;HeLa-GFP圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,,不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱 綠色熒光蛋白標(biāo)記人宮頸癌細(xì)胞,;HeLa-GFP圖片
形態(tài)特性 上皮樣,;多角
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 轉(zhuǎn)染pEGFP-N1,穩(wěn)定表達(dá)綠色熒光蛋白,。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS,;G418 200ug/ml
傳代方法 1:3傳代;5~7天1次,。
傳代情況 P5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:X,;CSF1PO:9,10,;D13S317:12,,13.3;D16S539:9,,10,;D18S51:16; D19S433:13,;D21S11:27,,28;D2S1338:17,;D3S1358:15,,18;D5S818:11,,12,;D7S820:8,,12;D8S1179:12,,13,;FGA:21;TH01:7,;TPOX:8,,12;vWA:16,,18;
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1,、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%,。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%,;二氧化碳,5%,。 溫度:37攝氏度,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3,、凍存液:90%*培養(yǎng)基,,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,。液氮儲(chǔ)存,。
二、細(xì)胞處理:
1,、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,,加入約8ml培養(yǎng)基,,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2,、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),,可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,,細(xì)胞變圓脫落后,,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存,。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),,應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),,加入部分新鮮培養(yǎng)基,,加入到凍存管中,,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存,。
質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC,、ECACC、DSMZ,、JCRB等,,購(gòu)買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增,、凍存,,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè),100%進(jìn)口來(lái)源,,100%保證5代以內(nèi),,活力>95%,無(wú)細(xì)菌,、真菌、支原體污染,。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次,。
操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),,吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,,加入適量胰酶,,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,,每隔2~3min顯微鏡下觀察,,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,,加入新鮮培養(yǎng)基,,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng),,隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),,1000rpm離心5min,,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,,用吸管小心吹散沉淀,,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),,加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng)。
140595-100小鼠抗 Trx 標(biāo)簽蛋白單抗 100 μL
植物種屬鑒定 PCR Mix 8100 次
L- 天門冬酰胺25g
果膠25g
COX IV 小鼠單抗1000 μL
CAS7681-49-4氟化25g
81225-250Tricine-SDS-PAGE 配膠液250mL
自誘導(dǎo)培養(yǎng)基 (lac 啟動(dòng)子 )200mL
羅丹明 B10g
糜蛋白酶原1 g
超氧化物試劑盒100 次
CAS9001-51-8己糖激酶2.5KU
131158-0.1山羊抗兔 IgG,,熒光素 488 標(biāo)記0.1mg
130829-50天凈沙細(xì)胞蛋白質(zhì) -RNA 雙提取試劑盒 50 次
N-2- 羥乙基 -N’-2- 乙基磺酸25g
5- 溴 -4- 氯 -3- 吲哚 -β-D- 半乳糖苷100mg
髓核細(xì)胞生長(zhǎng)因子5mL
電泳過(guò)硫酸銨0.1gx10
21-0400-5星形膠質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子5mL
90710-100RNA SDS( 十二烷基硫酸 )100gIminodiacetonitrile亞氨基二乙628-87-5
Sodium taurocholate?;悄懰?45-42-6
HAFNIUM鉿標(biāo)準(zhǔn)溶液7440-58-6
DIRECT FAST BROWN M直接紅棕M2429-82-5
Octadecyl 3-(3,5-di-tert-butyl-4-hydroxyphenyl)propionate抗氧劑10762082-79-3
Tetrabutylphosphonium chloride四丁基化膦2304-30-5
DIETHYLAMINO HYDROXYBENZOYL HEXYL BENZOATE二乙氨基羥酰基酸己酯302776-68-7
Oxobutanedioic acid草酰乙酸328-42-7
CHLORIDE STANDARD離子(Cl-)標(biāo)準(zhǔn)溶液16887-00-6
NAECL化學(xué)發(fā)光液
2,4,6-Trimethylbenzoyl chloride2,4,6-三基酰938-18-1
2,6-DIMETHYLNAPHTHALENE二基萘28804-88-8
4-Methoxyphenylacetone對(duì)氧基基丙122-84-9
Giemsa stain吉氏色素51811-82-6
tert-Butyl hydroperoxide過(guò)氧化氫叔丁醇75-91-2
TRIFLUOROMETHANESULFONAMIDE三磺酰胺421-85-2
Oxazole-2-amine2-氨基惡唑4570-45-0
2,5,6-TRIMETHYLBENZOXAZOLE2,5,6-三基并唑19219-98-8
Calconcarboxylic acid鈣試劑羧酸3737-95-9
Litmus paper blue藍(lán)石蕊試紙
LEAD(II) SULFIDE硫化鉛1314-87-0
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