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停乳鏈球菌 血清/培養(yǎng)基菌種保藏方法:
.斜面低溫保藏法
產(chǎn)品僅用于科研將菌種接種在適宜的斜面培養(yǎng)基上,,待菌種生長(zhǎng)*后,,置于4℃左右的冰箱中保藏,,每隔一定時(shí)間(保藏期)再轉(zhuǎn)接至新的斜面培養(yǎng)基上,,生長(zhǎng)后繼續(xù)保藏,,如此連續(xù)不斷,。此法簡(jiǎn)便易行,容易推廣,,存活率高,,故科研和上對(duì)經(jīng)常使用的菌種大多采用這種保藏方法。
2.石蠟油封藏法
此法是在無菌條件下,,將滅過菌并已蒸發(fā)掉水分的液體石蠟倒入培養(yǎng)成熟的菌種斜面(或半固體穿刺培養(yǎng)物)上,,石蠟油層高出斜面頂端lcm,使培養(yǎng)物與空氣隔絕,,加膠塞并用固體石蠟封口后,,垂直放在室溫或4℃冰箱內(nèi)保藏。由于液體石蠟阻隔了空氣,,使菌體處于缺氧狀態(tài)下,,而且又防止了水分揮發(fā),使培養(yǎng)物不會(huì)干裂,,因而能使保藏期達(dá)~2年,,或更長(zhǎng)。但此法不適合厭氧性細(xì)菌,。
3.砂土管保藏法
適用于產(chǎn)孢子的放線菌,、霉菌及形成芽孢的細(xì)菌,對(duì)于一些對(duì)干燥敏感的細(xì)菌如奈氏球菌,、弧菌和假單胞桿菌及酵母則不適用,。砂土管法兼具低溫、干燥,、隔氧和無營(yíng)養(yǎng)物等諸條件,,故保藏期較長(zhǎng)、效果較好,,且微生物移接方便,,經(jīng)濟(jì)簡(jiǎn)便。它比石蠟油封藏法的保藏期長(zhǎng),,約~0年,。
4.麩皮保藏法
此法以麩皮作為載體,吸附接入的孢子,,然后在低溫干燥條件下保存,。適用于產(chǎn)孢子的霉菌和某些放線菌,保藏期在年以上,。因操作簡(jiǎn)單,,經(jīng)濟(jì)實(shí)惠,工廠較多采用,。
5.冷凍真空干燥保藏法
簡(jiǎn)稱凍干法,,通常采用保護(hù)劑制備擬保藏菌種的細(xì)胞懸液或孢子懸液于安瓿管中,,再在低溫下快速將含菌樣凍結(jié),并減壓抽真空,,使水升華將樣品脫水干燥,,形成*干燥的固體菌塊。并在真空條件下立即融封,,造成無氧真空環(huán)境,,置于低溫下,使微生物處于休眠狀態(tài),,而得以保藏,。常用的保護(hù)劑有脫脂牛奶、血清,、淀粉,、葡聚糖等高分子物質(zhì)。
6.液氮超低溫保藏法
以甘油,、二甲基亞砜等作為保護(hù)劑,,在液氮超低溫(-96℃)下保藏。其主要原理是菌種細(xì)胞從常溫過渡到低溫,,并在降到低溫之前,,使細(xì)胞內(nèi)的自由水通過細(xì)胞膜外滲出來,以免膜內(nèi)因自由水凝結(jié)成冰晶而使細(xì)胞損傷,。此法操作簡(jiǎn)便、高效,、保藏期一般可達(dá)到5年以上,,是目前被*的效的菌種保藏技術(shù)之一。
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