土壤過氧化氫酶(S-CAT)ELISA試劑盒雙抗體夾心法(檢測(cè)未知抗原)

1,、用緩沖液將抗體稀釋至1-10ug/ml。在反應(yīng)孔中加0.1ml,，4℃ 過夜,。次日，棄去孔內(nèi)溶液,，用洗滌緩沖液洗3次,。

2、加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中，置37℃ 孵育1小時(shí),。然后洗滌(同時(shí)做空白孔,，陰性對(duì)照孔及陽(yáng)性對(duì)照孔)。

3,、加酶標(biāo)抗體：于各反應(yīng)孔中,，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5～1小時(shí),，洗滌,。

4、加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,，37℃ 10～30分鐘,。

5、終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml

6,、結(jié)果判定：可于白色背景上,，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽(yáng)性程度越強(qiáng),，陰性反應(yīng)為無(wú)色或極淺,，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+",、“-"號(hào)表示,。也可測(cè)OD值：在ELISA檢測(cè)儀上，于450nm(若以ABTS顯色,，則410nm)處,，以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍,，即為陽(yáng)性。

 ELISA試劑盒的儲(chǔ)存及有效期         

1. 未開封的試劑盒：所有試劑均按試劑瓶標(biāo)簽上所示保存,。請(qǐng)注意,，收到試劑盒后請(qǐng)盡快將TMB 洗滌液，終止液保存于4℃,，其他試劑保存于-20℃,。

2. 使用后的試劑盒：剩余試劑仍需按照試劑瓶標(biāo)簽所示的溫度保存，開封后的酶標(biāo)板要加干燥劑后密封保存于-20℃,，避免潮濕,。

注意：

試劑盒內(nèi)酶標(biāo)條可拆卸，按實(shí)驗(yàn)需求可分多次使用,；使用后的剩余試劑盒建議在實(shí)驗(yàn)后1個(gè)月內(nèi)使用完畢,。產(chǎn)品過期時(shí)間以盒子上的標(biāo)簽為準(zhǔn)，保質(zhì)期內(nèi)所有組分都確保是穩(wěn)定的。

 ELISA試劑盒報(bào)告內(nèi)容及標(biāo)準(zhǔn)         

1,、ELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線,；

2、詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)步驟,；

3,、完整的實(shí)驗(yàn)報(bào)告（試劑耗材，實(shí)驗(yàn)方法,，實(shí)驗(yàn)結(jié)果及結(jié)果說(shuō)明）,；