旋毛蟲通用探針?lè)晒釶CR檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)過(guò)程：

一、試劑準(zhǔn)備

1. DNA模板

2．對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中,，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無(wú)到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物,。可以是DNA也可以是RNA,，一般20多bp,，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）

3．10×PCR Buffer

4．2mM dNTPmix：含dATP,、dCTP、dGTP,、dTTP各2mM

5．Taq酶

二,、操作步驟

1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。

    10×PCR buffer             5μl

      dNTP mixl                 4μl

      引物1（10pM）               2μl

      引物2（10PM）              2μ

      Taq酶（2U/μl）            1μl

      DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl

      加ddH2O至               50 μl

   視PCR儀有無(wú)熱蓋,，不加或添加石蠟油,。

2．調(diào)整好反應(yīng)程序,。將上述混合液稍加離心,，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增,。一般：在93℃預(yù)變性3-5min,，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次,，后在72℃ 保溫7min,。

3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存,。

4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油,，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油,；否則,，直接取5-10μl電泳檢測(cè)

三、注意事項(xiàng)

１．PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行,。好設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室,。

２．純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有影響。一般而言,，只要能夠得到可靠的結(jié)果,，純化的方法越簡(jiǎn)單越好。

３．產(chǎn)品僅用于科研所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染,。操作過(guò)程中均應(yīng)戴手套,。

蝦肝腸胞蟲（EHP）核酸檢測(cè)試劑盒（PCR-熒光探針?lè)ǎ?/p>

對(duì)蝦壞死性肝胰腺炎（NHPB）核酸檢測(cè)試劑盒（PCR-熒光探針?lè)ǎ?/p>

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傳染性造血器官壞死病毒（IHNV）RNA核酸檢測(cè)試劑盒（PCR-熒光探針?lè)ǎ?/p>

赤點(diǎn)石斑魚神經(jīng)壞死病毒（RGNNV）RNA核酸檢測(cè)試劑盒（PCR-熒光探針?lè)ǎ?/p>

對(duì)蝦肝胰腺細(xì)小病毒（HPV）核酸檢測(cè)試劑盒（PCR-熒光探針?lè)ǎ?/p>

錦鯉皰疹病毒（KHV）核酸檢測(cè)試劑盒（PCR-熒光探針?lè)ǎ?/p>

鯉春病毒血癥病毒（SVCV）RNA核酸檢測(cè)試劑盒（PCR-熒光探針?lè)ǎ?/p>

草魚出血病I型病毒（GCRV I）RNA核酸檢測(cè)試劑盒（PCR-熒光探針?lè)ǎ?/p>

草魚出血病II型病毒（GCRV II）RNA核酸檢測(cè)試劑盒（PCR-熒光探針?lè)ǎ?/p>

草魚出血病III型病毒（GCRV III）RNA核酸檢測(cè)試劑盒（PCR-熒光探針?lè)ǎ?/p>

病毒性出血性敗血癥病毒（VHSV）RNA核酸檢測(cè)試劑盒（PCR-熒光探針?lè)ǎ?/p>

傳染性胰臟壞死病病毒（IPNV）RNA核酸檢測(cè)試劑盒（PCR-熒光探針?lè)ǎ?/p>

病毒性神經(jīng)壞死病毒（VNNV）RNA核酸檢測(cè)試劑盒（PCR-熒光探針?lè)ǎ?/p>

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創(chuàng)傷弧菌核酸檢測(cè)試劑盒（恒溫?zé)晒夥ǎ?/p>

折光馬爾太蟲核酸檢測(cè)試劑盒（PCR-熒光探針?lè)ǎ?/p>

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