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鴨子磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(pAMPK)ELISA試劑盒反應(yīng)步驟:
(1)嚴格按照試劑說明書進行操作,。操作前將試劑在室溫下平衡30~60min,。
(2)加樣后及時放人孵箱。標本較多時,,要分批操作,。按說明步驟嚴格控制操作時間,,防止孵育時間人為延長,,導致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,,難以清洗*。
(3)封板溫育時,,各孔一定要封嚴,,防止陽性標本的液體蒸發(fā),產(chǎn)生周邊現(xiàn)象從而導致“花板"的出現(xiàn),。
(4)用洗板機洗板時,,保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,,洗完板后在吸水紙(選擇干凈,、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干:還要防止針口有纖維蛋白或異物,,ELISA試劑盒這些異物在洗板的過程中易產(chǎn)生拖帶現(xiàn)象而導致“花板"的出現(xiàn),。
(5)合理安排檢測量,以免反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長,。
(6)加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干,。
(7)顯色劑盡量在臨用前配制,,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用,。
(8)加樣時保持顯色劑不外流,;A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械,。加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡,。
(9)應(yīng)保證酶標板清潔,整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸,。以上的措施可以使“花板"降至低限度,。ELISA試劑盒豚鼠從而提高檢測的特異性。并得到更準確,、可靠的實驗結(jié)果,。
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