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細胞培養(yǎng)基常用幾種重要的添加成份及使用過程中應注意的問題

時間:2017/5/4閱讀:2804
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酚紅在ATCC細胞培養(yǎng)基中用作pH值的指示劑,一般情況下,,可以通過酚紅的指示作用判斷培養(yǎng)基的pH值,,中性時為紅色,,酸性時為黃色,堿性時為紫色,;但低血清或是無血清細胞培養(yǎng)基中酚紅的含量與普通細胞培養(yǎng)基中的酚紅含量不同,,不能通過肉眼觀察或通過經(jīng)驗來判定pH值,建議使用pH計進行測定,。酚紅通常對含血清的細胞培養(yǎng)基的生物制品質(zhì)量并不會產(chǎn)生明顯影響,,也可通過純化技術去除,但酚紅在無血清細胞培養(yǎng)基中可能帶來胞內(nèi)鈉/鉀失衡,,影響細胞生長,,這種作用能被血清所中和或減輕。因此,,酚紅并不是細胞培養(yǎng)基中必需的一種成份,很多國外的疫苗或抗體企業(yè)在過程中都使用無酚紅細胞培養(yǎng)基,。
碳酸氫鈉在ATCC細胞培養(yǎng)基中主要是作為緩沖系統(tǒng),,此外還具有調(diào)節(jié)滲透壓的作用。通常產(chǎn)品使用說明中的碳酸氫鈉推薦量是一個標準,、安全量,,是在科學的基礎上根據(jù)實踐經(jīng)驗所得,但是由于不同的細胞系(株)不同,,同一株細胞適應環(huán)境也可能不同(細胞耐受性不同等),,且存在的地域性水質(zhì)差異等,在實際過程中也可稍作改動,,但使用者需做相應的檢測(理化及細胞試驗等),。
HEPES是一種非離子緩沖液,在pH 7.2 ~7.4范圍內(nèi)具有較好的緩沖能力,,其在高濃度時對一些細胞可能有毒,。HEPES緩沖液可與低水平的碳酸鈉(0.34 g /L)共用,以抵消因額外加入HEPES引起的滲透壓增加,。其安全濃度范圍是10~25 mmol/L,。
丙酮酸鈉可以作為細胞培養(yǎng)中的替代碳源,盡管細胞更傾向于以葡萄糖作為碳源,,但是,,如果沒有葡萄糖的話,細胞也可以代謝丙酮酸鈉,。
谷氨酰胺在溶液中很不穩(wěn)定,,4℃下放置1周可分解50%,使用中單獨配制,,置-20℃冰箱中保存,,使用前加入ATCC細胞培養(yǎng)液中,。

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