人血清(Human Serum)適用于培養(yǎng)人來源細胞及敏感性細胞系。人AB血清采用正常健康男性血液為原料,,所有供體來自美國FDA認證機構,,并去除血液中纖維蛋白原。作為天然off-the-clot產(chǎn)品,,本品不含有抗凝劑或防腐劑,。所有供體都進行過病毒標記檢測,并且檢測結果為陰性,。
為什么選用人血清,?人血清用于多種人細胞的培養(yǎng)效果很好,尤其是與人免疫系統(tǒng)相關的細胞培養(yǎng),。人血清還能作為淋巴細胞培養(yǎng)基的補充成分,、免疫組化染色的封閉劑以及HLA組織配型的陰性對照。
人血清off-the-clot分離自全血樣品,,在自然凝固后,,將血液中的細胞碎片和凝塊離心去除,最終得到的成分來自于血小板,,這些組分對于細胞生長具有重要作用,。本品已經(jīng)過無菌過濾。
Q&A
1.為什么要使用人血清,?
當培養(yǎng)大多數(shù)人來源細胞時,,人血清可以得到更好的實驗結果,尤其是與人免疫系統(tǒng)相關的細胞,。人血清可以作為淋巴細胞培養(yǎng)補體,,作為免疫組化反應中的封閉劑,也可以在人白細胞抗原(HLA)組織分型實驗中作為陰性對照,。
2.為什么要使用人AB血清,?
人AB血清中缺少抗A,、B血型抗原的抗體,常用于使免疫反應降到最di,。已經(jīng)證實,,人AB血清可以提高多數(shù)人來源細胞生長速率,并且使用濃度比混合型血清更低,。
適用于細胞,、組織器官培養(yǎng)、細胞株保藏,、單抗研制,,是醫(yī)院、科研院校,、動物疫苗,、生物制藥廠家重要培養(yǎng)基之一。
正常人AB血清采用AB血型正常人血液為原料,,經(jīng)無菌采集,、分離、微孔過濾后而成,。本產(chǎn)品無支原體,、無病毒、無噬毒體,、內(nèi)毒素含量低于1EU/ml,,適用于細胞、組織器官培養(yǎng),、細胞株保藏,、單抗研制、T細胞免疫治療,,是醫(yī)院,、科研院校、動物疫苗,、生物制藥廠家重要培養(yǎng)基之一,。也適用于動物免疫,血清IgG制備,,病理組化封閉,,ELISA等等。血漿與血清的區(qū)別是血清中不含纖維蛋白原等凝血因子,。血漿是血液的液體成分,,血細胞懸濁于其中。
人體含有2750-3300毫升血漿,,約占血液總體積的55%,。血漿的絕大部分是水(體積的90%),,其中溶解的物質(zhì)主要是血漿蛋白,還包括葡萄糖,、無機鹽離子,、激素以及二氧化碳。血漿的主要功能是運載血細胞,,同時也是運輸分泌產(chǎn)物的主要媒介,。將新鮮血液離心,使血細胞沉降,,上層淡黃色清液即是血漿,。血清是血漿中不含纖維蛋白原的膠狀液體,具有維持血液的正常粘度,、酸堿度,、滲透壓等作用。
它主要由水和各種化學成分組成,這些化學成分包括白蛋白,、α1,、α2、β,、γ-球蛋白,甘油三酯,總膽固醇,谷丙轉(zhuǎn)氨酶等,。血清中含有各種血漿蛋白、多肽,、脂肪,、碳水化合物、生長因子,、激素,、無機物等,這些物質(zhì)對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的,。融解過程中必須搖晃均勻減少蛋白沉淀的產(chǎn)生,。
特點:人AB血清中缺少抗A、B血型抗原的抗體,,常用于使免疫反應降到最di,。已經(jīng)證實,人AB血清可以提高多數(shù)人來源細胞生長速率,,并且使用濃度比混合型血清更低,。更適用于細胞、組織器官培養(yǎng),、細胞株保藏,、單抗研制。
應用[8][9]
正常人AB血清可用于研究培養(yǎng)成人骨髓基質(zhì)干細胞增殖及成骨分化:
大段骨缺損的重建修復是骨外科常見的重要的臨床難題,。當前臨床治療方法主要包括骨材料移植(自體移植,、同種異體移植或異種移植),、不同生物材料植入或骨傳輸生長方法(Ilizarov技術),但這些技術均存在一定的不足,不能滿足臨床需要。近年來骨組織工程的迅速發(fā)展為骨缺損的治療提供了新的思路,并且已由基礎研究過渡到臨床的初步應用階段,。
臨床應用不同于動物實驗,首先需要考慮治療的安全性,。因此骨組織工程種子細胞的選擇,材料的選擇以及種子細胞的體外培養(yǎng)過程等問題都是需要謹慎注意的。骨髓基質(zhì)干細胞(marrow mesenchymal stromal cells, MSCs)因其取材方便,可在體外大量擴增并保持成骨潛能,較低的免疫原性,轉(zhuǎn)入外源基因后不影響其增殖,、分化特性等特點,被認為是骨組織工程理想的種子細胞,。
傳統(tǒng)的細胞培養(yǎng)方法采用胎牛血清作為營養(yǎng)支持。盡管優(yōu)質(zhì)胎牛血清經(jīng)過了嚴格的處理,但仍然存在潛在傳播疾病的風險和免疫排斥反應,。在成人骨髓基質(zhì)干細胞增殖及分化的研究中采用AB血清(AB serum,ABS),、自體血清(autologous serum,AS)替代胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)作為營養(yǎng)基質(zhì),比較3種不同培養(yǎng)體系體外培養(yǎng)hBMSCs增殖分化的效果,為骨組織工程由基礎研究向臨床應用提供一定的理論依據(jù)。
研究目的探討AB血清,、自體血清替代胎牛血清體外培養(yǎng)成人骨髓基質(zhì)干細胞增殖及成骨分化的效果,并初步探討其促成骨的機制,。結果AB血清促hBMSCs曾殖的效率zui高。流式細胞儀檢測細胞凋亡率結果顯示,胎牛血清組細胞凋亡率為(4.34±0.59)%,自體血清組為(4.31±0.70)%,AB血清組為(4.33±0.76)%,。
各相同時間點,AB血清組細胞堿性磷酸酶活性均高于胎牛血清組,、自體血清組,且于7d出現(xiàn)峰值。實驗證明,采用A