【產(chǎn)品介紹】

HAKATA無外泌體血清(Exosome-depleted)）是一款去除外泌體的特級血清產(chǎn)品,。剔除率高達(dá)99%，同時(shí)保持了和處理前血清相同的良好的細(xì)胞生長及維持功能，能夠滿足幾乎所有細(xì)胞的生長營養(yǎng)需求，包括各種腫瘤和轉(zhuǎn)化細(xì)胞系,、原代細(xì)胞、免疫細(xì)胞,、部分干細(xì)胞（胚胎干細(xì)胞,、間充質(zhì)干細(xì)胞等）等。同時(shí)由于本血清中血紅蛋白和內(nèi)毒素含量水平都非常低,，因此特別適合于培養(yǎng)對環(huán)境相對敏感和要求較高的細(xì)胞,。適用于外泌體和細(xì)胞外囊泡、miRNA,、細(xì)胞間通信等研究,。

【產(chǎn)品特點(diǎn)】

1,、內(nèi)毒素含量低,，三次納米級過濾

2、嚴(yán)格控制批次差異

3,、來源可靠,、可溯源

4、每個(gè)批次均提供檢驗(yàn)檢疫報(bào)告

5,、適合各種常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)

6,、干冰運(yùn)輸，建議存儲(chǔ)溫度為-20℃至-10℃

HAKATA無外泌體血清主要作用

提供基本營養(yǎng)物質(zhì)：氨基酸,、維生素,、無機(jī)物、脂類物質(zhì),、核酸衍生物等,，是細(xì)胞生長 必須的物質(zhì)。

提供激素和各種生長因子：胰島素,、腎上腺皮質(zhì)激素,、類固 醇激素（雌二醇、睪酮,、孕酮）等,。生長因子如成纖維細(xì)胞生長因子,、表皮生長因子、血 小板生長因子等,。

提供結(jié)合蛋白：結(jié)合蛋白作用是攜帶重要地低分子量物質(zhì),，如白蛋白攜帶維生素、脂肪 ,、以及激素等,，轉(zhuǎn)鐵蛋白攜帶鐵。結(jié)合蛋白在細(xì)胞代謝過程中起重要作用,。

提供促接觸和伸展因子使細(xì)胞貼壁免受機(jī)械損傷,。

對培養(yǎng)中的細(xì)胞起到某些保護(hù)作用：有一些細(xì)胞，如內(nèi)皮細(xì)胞,、骨髓樣細(xì)胞可以釋放蛋 白酶,，血清中含有抗蛋白酶成分，起到中和作用,。這種作用是偶然發(fā)現(xiàn)的,，現(xiàn)在則有目的 的使用血清來終止yi蛋白酶的消化作用。因?yàn)閥i蛋白酶已經(jīng)被廣泛用于貼壁細(xì)胞的消化傳 代,。血清蛋白形成了血清的粘度,，可以保護(hù)細(xì)胞免受機(jī)械損傷，特別是在懸浮培養(yǎng)攪拌時(shí) ,，粘度起到重要作用,。血清還含有一些微量元素和離子，他們在代謝解毒中起重要作用,， 如SeO3,硒等 .

血清保存

血清應(yīng)保存在-5,。C至-2O。C,。若存放于4,。C 時(shí)，保質(zhì)期減至一個(gè)月,。若您一次無法用完一瓶,，建議無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi) ，再放回冷凍,。

解凍血清

將血清從冷凍箱取出后,，先置于2-8。C冰箱使之溶解,，然后在室溫下使 之全溶,。但必須注意的是，溶解過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻,。

注意事項(xiàng)：

1,、解凍血清時(shí),，請按照所建議的逐步解凍法(-2O。C至4,。

C至室溫),，若血清解凍時(shí)改變的溫度太大(如-20。C至37,。C),，實(shí)驗(yàn)顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。

2,、解凍血清時(shí),，請隨時(shí)將之搖晃均勻，使溫度及成分均一,，減少沉淀的發(fā)生.

3,、請勿將血清置于37。C太久,。若在37,。C放置太久，血清會(huì)變得混濁,，同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會(huì)因此受到損害,，而影響血清的質(zhì)量。

4,、血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,，若非必要，可以無須做此步驟,。

5,、若必須做血清的熱滅活,，請遵守56,。C，30分鐘的原則,，并且隨時(shí)搖 晃均勻,。溫度過高，時(shí)間過久或搖晃不均勻,，都會(huì)造成沉淀物的增多,。 [5]血清解凍后發(fā) 現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn)，該如何處理?　欲去除這些絮狀沉淀物,，可以將血清分裝至無菌離 心管內(nèi),，以400g稍微離心，上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾,。但不建議以過濾的方 法去除這些絮狀沉淀物,，因?yàn)樗赡軙?huì)阻塞過濾膜,。

何謂熱滅活?

一般是以56C，30分鐘來處理已解凍的血清,，因?yàn)榇思訜岵襟E,，可以使補(bǔ)體去活化， 而補(bǔ)體所參與的反應(yīng)有:溶細(xì)胞活性,，平滑肌的收縮,，肥大細(xì)胞和血小板組胺的釋放，增 強(qiáng)吞噬作用,，淋巴細(xì)胞,、巨噬細(xì)胞的趨化和激活。

有必要做熱滅活嗎?

實(shí)驗(yàn)顯示,，經(jīng)過正確處理的熱滅活血清,，對大多數(shù)的細(xì)胞而言是不需要的。經(jīng)此處理 過的血清對細(xì)胞的生長只有微小的促進(jìn),，或*沒有任何作用,，甚至通常因?yàn)楦邷靥幚碛?響了血清的質(zhì)量，而造成細(xì)胞生長速率的降低,。而經(jīng)過熱處理的血清,，沉淀物的形成會(huì)顯 著的增多，這些沉淀物在倒立顯微鏡下觀察,，像是 "小黑點(diǎn)",，常常會(huì)讓研究者誤以為是血 清遭受污染，而把血清放在37C環(huán)境中,，又會(huì)使此沉淀物更增多,，使研究者誤認(rèn)為是微生物的分裂擴(kuò)增。

HAKATA外泌體血清50ml

 胎牛血清（FBS）已在真核細(xì)胞培養(yǎng)中使用了幾十年了,。然而,，很少有人關(guān)注FBS的RNA對培養(yǎng)的細(xì)胞會(huì)產(chǎn)生什么樣的生物學(xué)效應(yīng)。來自哈佛醫(yī)學(xué)院的研究人員用RNA測序,，證明了FBS含有蛋白質(zhì)編碼和調(diào)控的多種RNA,，包括mRNA、miRNA,、rRNA和snoRNA等,。它們中的大多數(shù)（>70％）仍然存在于細(xì)胞外囊泡（EV）和細(xì)胞間通訊研究中常使用的長時(shí)間超速離心得到的無囊泡FBS（vesicle-depleted FBS, vdFBS）中。FBS相關(guān)的RNA會(huì)在分離細(xì)胞外膜泡RNA（exRNA）時(shí)一同被分離出來,，這會(huì)對下游RNA分析造成干擾,。許多進(jìn)化上保守的FBS源的RNA種類會(huì)被錯(cuò)誤地認(rèn)為是人或小鼠細(xì)胞的轉(zhuǎn)錄本。

值得注意的是,，在FBS中含量豐富的一些miRNAs,，如miR-122,、miR-451A和miR-1246，先前已被報(bào)道為在培養(yǎng)細(xì)胞來源的細(xì)胞外膜泡中富含的miRNAs,，這可能是胎牛血清中miRNAs造成的假象,。對公開可用的exRNA數(shù)據(jù)庫的分析支持FBS污染的概念。此外,，F(xiàn)BS轉(zhuǎn)錄本可被培養(yǎng)的細(xì)胞吸收,，并影響高度敏感的基因表達(dá)譜技術(shù)的結(jié)果。因此,，實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)過程中采取減少FBS源RNA干擾的預(yù)防措施是非常有必要的,。

大多數(shù)細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)的需要在培養(yǎng)基中添加FBS，而FBS來源于胎牛血液,，含有高豐度的牛外泌體,。針對目的細(xì)胞分泌的外泌體研究時(shí)，這些牛外泌體可能會(huì)對結(jié)果產(chǎn)生顯著的干擾,，因此,，需要通過無外泌體血清來解決此問題。

 細(xì)胞在正常含血清的培養(yǎng)基中培養(yǎng)一定的時(shí)間后,，細(xì)胞融合度約為60% - 70%時(shí),，移去原有含血清的培養(yǎng)基，換成新鮮的無外泌體血清培養(yǎng)基,，繼續(xù)培養(yǎng)48h左右,，細(xì)胞融合度達(dá)到80%-95%左右時(shí)收取上清,該上清液即可用于提取外泌體。

無外泌體血清50ml

外泌體特指直徑在30-100nm的盤狀囊泡,，其內(nèi)部包裹了多種蛋白質(zhì),、mRNA、non-coding RNA等分子,。外泌體主要來源于細(xì)胞內(nèi)多囊泡體,，經(jīng)多囊泡體外膜與細(xì)胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中。目前大量文獻(xiàn)報(bào)道,，幾乎所有類型的細(xì)胞都可以產(chǎn)生并釋放外泌體,，不同的生物體液(血液、尿液,、腦脊液、唾液,、乳汁,、腹水)中都發(fā)現(xiàn)有大量外泌體存在，外泌體由細(xì)胞分泌釋放后,，通過個(gè)種體液在體內(nèi)傳播,，被靶細(xì)胞攝入后,，釋放內(nèi)部的生物分子，參與細(xì)胞間的通訊,，調(diào)節(jié)細(xì)胞功能,。

*，細(xì)胞不斷向細(xì)胞外空間分泌大量的小囊泡,。這些小囊泡的直徑大多為50-200 nm,，脂雙層結(jié)構(gòu)，介導(dǎo)了細(xì)胞間的運(yùn)輸,。至于運(yùn)輸了什么,，人們沒有太在意，大抵是一些不重要的蛋白吧,。直到zui近,，人們才發(fā)現(xiàn)他們錯(cuò)了。exosome及其他細(xì)胞外囊泡正起著*的細(xì)胞通訊作用,。
   外泌體是包含了復(fù)雜 RNA 和蛋白質(zhì)的小膜泡 (30-150nm),。 所有培養(yǎng)的細(xì)胞類型均可分泌外泌體，且外泌體天然存在于體液中,，包括血液,、唾液,、尿液,、腦脊液和乳汁中。 有關(guān)他們分泌和攝取及其組成,、“運(yùn)載物"和相應(yīng)功能的精確分子機(jī)制剛剛開始研究,。 外泌體目前被視為特異性分泌的膜泡,，參與細(xì)胞間通訊，對外泌體的研究興趣日益增長,，無論是研究其功能還是了解如何將其用于微創(chuàng)診斷的開發(fā),。

無外泌體血清Exosome-free FBS，來自國外*胎牛血清,，國內(nèi)技術(shù)水平生產(chǎn),，*。外泌體（exosome）及其他細(xì)胞外囊泡（EV）一直是不起眼的灰姑娘,，而zui近診斷和治療潛力的發(fā)現(xiàn),，仿佛給這些小囊泡穿上了水晶鞋，使其一晃變成光彩奪目的公主,。