CCK-8細(xì)胞增殖-毒性檢測試劑盒日本同仁
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實驗技術(shù)服務(wù)內(nèi)容,。歡迎廣大師生選購,。
CCK-8法與普通的MTT法相比,具有顯著特點:
★靈敏度高,,數(shù)據(jù)可靠,重現(xiàn)性好
★操作簡便,,省時省力
★水溶性,,不需要換液,尤其適合于懸浮細(xì)胞
★無需放射性同位素和有機溶劑,,對細(xì)胞毒性低
★為1瓶溶液,,毋需預(yù)制,即開即用
★適合于高通量藥物篩選
CCK-8用途:藥物篩選,、細(xì)胞增殖測定,、細(xì)胞毒性測定、腫瘤藥敏試驗
CCK-8試劑盒在國內(nèi)科研院所,、重點大學(xué),、*醫(yī)院被廣泛應(yīng)用,,認(rèn)可度高,使用CCK-8發(fā)表的中外文獻(xiàn)達(dá)600多篇,,其中截止08年底SCI影響因子IF>10分的論文有37篇,,zui高IF38.5分
CCK-8 檢測步驟
1. 向各孔中加入100 μl細(xì)胞懸液。a)
2. 在37℃下預(yù)孵育培養(yǎng)板,。b)
3. 向各孔中加入各濃度的待測溶液c)10 μl,。
4. 37℃下孵育。
5. 向各孔中加入10 μl的CCK-8溶液d),。
6. 37℃下孵育1-4小時,。e)
7. 測定450 nm處的OD值。
CCK-8細(xì)胞增殖-毒性檢測試劑盒日本同仁
a) 使用適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基制備50,000-100,000個/ml的細(xì)胞懸液,。
b) 建議使用CO2培養(yǎng)箱預(yù)培養(yǎng),。
c) 使用培養(yǎng)基或PBS來制備溶液。
d) 如果待測溶液有還原性,,測定不含細(xì)胞,,但含有CCK-8的待測溶液在450 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,,則可以直接加入CCK-8 ,,如果吸光度相對較大,則需要除去培養(yǎng)基,,并用培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,,然后加入新的100 μl培養(yǎng)基和10 μl CCK-8進行檢測。
e) 白細(xì)胞可能需要培養(yǎng)較長時間,。
活力計算
細(xì)胞活力*(%)=[A(加藥)-A(空白)]/[A(0加藥)-A(空白)] ×100
A(加藥):具有細(xì)胞,、CCK-8溶液和藥物溶液的孔的吸光度
A(空白):具有培養(yǎng)基和CCK-8溶液而沒有細(xì)胞的孔的吸光度
A(0加藥):具有細(xì)胞、CCK-8溶液而沒有藥物溶液的孔的吸光度
*細(xì)胞活力:細(xì)胞增殖活力或細(xì)胞毒性活力