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K562/Adr細(xì)胞-K562/Adr耐藥株 培養(yǎng)

時間:2017-4-12閱讀:1272

白血病阿霉素耐藥株K562/Adr

 

人白血病阿霉素耐藥株K562/Adr  株特性:

生長特性:貼壁生長

形態(tài)特征:上皮細(xì)胞

微生物及支原體檢測:陰性

安全性:所有腫瘤和病毒轉(zhuǎn)染的細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,并請注意防護(hù),,所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需高壓滅菌后方能丟棄,。收到細(xì)胞后,,在倒置鏡下(是在4X物鏡)觀察整個細(xì)胞生長情況,。

(一)如果細(xì)胞未長滿,,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內(nèi),,嚴(yán)格無菌操作,,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶,吸出培養(yǎng)液,,換 10ml新鮮培養(yǎng)液后繼續(xù)培養(yǎng),。

()如果細(xì)胞已長滿,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。具體步驟如下:

1. 棄去培養(yǎng)液,,用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次。

2. 1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,倒放于37℃培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱,,之后翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶10-30秒后,,在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓,,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量*培養(yǎng)基終止消化。

3. 6-8ml/瓶補(bǔ)加*培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出一半,,分到新的培養(yǎng)瓶中。如果沒有特別說明,,收到細(xì)胞后的*次傳代一般是一傳二,。

人白血病阿霉素耐藥株K562/Adr 注意事項:

1、觀察細(xì)胞在低倍鏡(45X物鏡)下進(jìn)行,,否則不能準(zhǔn)確判斷細(xì)胞的傳代密度,。看細(xì)胞的形態(tài)請在10X20X物鏡下,。

2,、瓶中運輸培養(yǎng)基不能重復(fù)再用,請換用加雙抗的新培養(yǎng)基,細(xì)胞凍存后,培養(yǎng)基中可不加任何抗生素,。

3,、有些細(xì)胞貼壁不牢,如發(fā)現(xiàn)貼壁細(xì)胞有脫落,,可離心吹打后接種到新瓶內(nèi),。

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