EHEB細(xì)胞，EJM細(xì)胞如何算是消化成功

不是細(xì)胞全部成間隔分布很離散的單個(gè)圓形才算消化好了,，一般你肉眼觀察貼壁細(xì)胞層,，只要能移動(dòng)了，多半呈沙壯移動(dòng),，其實(shí)已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細(xì)胞消化或者吹打成*分離細(xì)胞,，這是沒有必要的,。一般能移動(dòng)了，說明細(xì)胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了,，細(xì)胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細(xì)胞已經(jīng)獨(dú)立分布了（雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布）,。這個(gè)時(shí)候應(yīng)該停止消化,，不要等到看到鏡下所有細(xì)胞都分離得非常好，間隙很大,，才停止,。細(xì)胞就是*成單個(gè)細(xì)胞懸液,，之后在貼壁的過程中仍然會(huì)聚集，這個(gè)是貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,，尤其是腫瘤細(xì)胞的一個(gè)特性，無論死活的細(xì)胞都是如此,，你可以嘗試,，準(zhǔn)備100%的單個(gè)細(xì)胞懸液,，貼壁后觀察細(xì)胞，仍然是幾個(gè)幾個(gè)細(xì)胞聚集在一起,。一些懸浮培養(yǎng)細(xì)胞也是如此,，容易聚集,，不要去嘗試過幾個(gè)小時(shí)就拿出來吹打成單細(xì)胞懸液（不要笑,，這個(gè)是初養(yǎng)懸浮細(xì)胞的人常犯的錯(cuò)誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個(gè)一個(gè)分開）,。細(xì)胞只要能從基質(zhì)上脫離下來,，這個(gè)時(shí)候即使是成片的（比如Calu-3細(xì)胞），吹打不超過20次后（一般10次即可）,，成小規(guī)模聚集（10個(gè)細(xì)胞左右），是正常的,，不要試圖再去延長(zhǎng)消化時(shí)間,，或者象有的同學(xué)那樣吹打1h，等待單細(xì)胞懸液出現(xiàn),。