COV318細胞,COV362細胞株的培養(yǎng)和傳代
產品名稱:COV318細胞
中文名稱:
貨號:COV318
規(guī)格:1~3*106細胞/25cm2培養(yǎng)瓶
上海蒂科生物 細胞株、血清、培養(yǎng)基,、 各種細胞培養(yǎng)相關試劑,開學酬賓*中,,更多產品,,更大優(yōu)惠,敬請??!
用于檢測細胞因子的細胞株通常培養(yǎng)于含10%小牛血清和抗生素的培養(yǎng)液中,培養(yǎng)細胞因子依賴細胞株還有加入適量細胞因子,。在37℃ 5% CO2的飽和水汽二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng),,3~4天傳代一次。
懸浮生長細胞的傳代:
直接直接吸去或離心后吸去培養(yǎng)上清液,,用新鮮培養(yǎng)液懸浮細胞,1:3或1:5稀釋細胞后,,分瓶繼續(xù)培養(yǎng),。
帖壁生長細胞的傳代:
吸去培養(yǎng)液,用PBS洗滌細胞一次,,加入消化液,,在37℃中消化約3~10分鐘,待細胞開始脫落時,,倒去消化液,,加入新鮮培養(yǎng)液,懸浮和吹打分散細胞,。也可以待細胞*消化脫落,,500×g離心5分鐘,去除消化液,,用新鮮培養(yǎng)液懸浮細胞,。1:3或1:5稀釋細胞后,分瓶繼續(xù)培養(yǎng),。
2,、細胞株的凍存:
(1)取培養(yǎng)2~3天生長旺盛的細胞,用細胞培養(yǎng)液將細胞配成2×106~2×107/ml,。
(2)在1ml細胞凍存管中加入0.5ml細胞懸液,,0.4ml小牛血清和0.1ml二甲基亞砜(或甘油),混勻后密封,。置4℃ 1小時,,-20℃ 2小時,,然后直接放入液氮中或置液氮蒸汽上隔日后浸入液氮中。
3,、細胞株的復蘇:
復蘇時,,從液氮中取出凍存管,立即置37℃水浴中融化細胞,。將細胞直接加入10ml含15%小牛血清的RPMI-1640培養(yǎng)液中,,置37℃ 5%CO2飽和水汽二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。懸浮細胞待細胞全部沉降后小心吸去上清液,,更換新鮮的上述培養(yǎng)液,,繼續(xù)培養(yǎng);帖壁細胞則培養(yǎng)2~3實驗,。
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