COLO-679細胞,，COLO-680N細胞收到貨的注意事項

規(guī)格：1~3*106細胞/25cm2培養(yǎng)瓶

上海蒂科生物 細胞株、血清、培養(yǎng)基,、 各種細胞培養(yǎng)相關(guān)試劑，開學酬賓*中,，更多產(chǎn)品,，更大優(yōu)惠，敬請！,！

1. 收到細胞株包裹時,，請檢查細胞株冷凍管是否有解凍情形，若有請立即通知,。細胞株請盡速開始培養(yǎng),，或立即冷凍保存（置于-70 ℃，隔夜后,，移到液氮）,。

2. 冷凍細胞解凍程序：

2.1. 依據(jù)細胞株數(shù)據(jù)單之基礎(chǔ)培養(yǎng)基種類、血清種類和其它之成份和比例,，制備培養(yǎng)基,。絕大多數(shù)之細胞均無法立即適應(yīng)不同之基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同之 血清種類，若因?qū)嶒炐枰?，必須有所不同時,，務(wù)必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成， 確定細胞適應(yīng)后,，方進行所需之實驗,。

2.2. FBS （fetal bovine serum，胚牛血清）,，CS （calf serum,，小牛血清）和HS （horse serum，馬血清）,，對細胞而言差異極大,，請務(wù)必依據(jù)細胞株資料單之血清種類培養(yǎng)之。

2.3. 將培養(yǎng)基置于37 ℃ 水槽中回溫,，回溫后噴以70 % 酒精并擦拭之,，移入無菌操作臺內(nèi)。取出冷凍管,，立即放入37 ℃ 水槽中快速解凍,，水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿，否則易發(fā)生污染,。輕搖冷凍管使其在1 分鐘內(nèi)全部融化后,，以70 % ethanol 擦拭冷凍管外部， 移入無菌操作臺內(nèi),。

2.4. 依據(jù)細胞種類和濃度,，于無菌操作臺內(nèi)取10 ml 培養(yǎng)基加至T25 或T75 flask中。取出已解凍之細胞懸浮液,，緩緩加入T25 或T75 flask 內(nèi)之培養(yǎng)基,，混合均勻,，放入37 ℃，5 % CO₂ 培養(yǎng)箱培養(yǎng),。

2.5. 對絕大多數(shù)細胞而言,，1 % 以下之冷凍保護劑DMSO，不會對細胞之貼附或活 化有不良影響,，不需立刻由解凍細胞中去除,， 待第二天確定細胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對極少數(shù)因?qū)MSO 敏感或會造成細胞分化之細胞,，需 立即去除DMSO 者,， 則可將解凍后之細胞懸浮液放入5 - 10 ml 培養(yǎng)基中，離心300 xg （約1000 rpm）,，5 分鐘,，小心移去上清液，加入適量新鮮培養(yǎng)基,，將細胞均勻混合后,，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中，再放入37 ℃,，5 % CO₂ 培養(yǎng)箱培養(yǎng),。收到T25 flask 細胞時，處理方式為：

2.5.1. 于寄送過程中,，為避免起泡造成細胞脫落死亡,，T25 flask 均加滿培養(yǎng)基。請檢查flask 外觀,，并于顯微鏡下觀察細胞生長狀況和有無污染現(xiàn)象,，若有任何問題，不要打開蓋子,，請立即通知細胞實驗室。

2.5.2. 將原封之T25 flask 靜置于37 ℃,，5 % CO₂ 培養(yǎng)箱中,，使細胞回溫至37 ℃，并讓運送過程中少數(shù)脫落的細胞可再附著生長,。隔天后,，于無菌操作箱內(nèi)取出flask 內(nèi)之培養(yǎng)基，（取出之培養(yǎng)基可以再使用）,，僅留約5-10ml 培養(yǎng)基于flask 內(nèi),，依一般培養(yǎng)方式再將細胞置入培養(yǎng)箱中，或細胞已長滿盤,， 則將細胞做傳代培養(yǎng),。