BCP-1細胞,，BCP-1細胞株的復(fù)蘇方法

產(chǎn)品名稱：BCP-1細胞

中文名稱：B細胞淋巴瘤不明細胞

貨號：BCP-1

規(guī)格：1~3*106細胞/25cm2培養(yǎng)瓶

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一,、細胞復(fù)蘇的原則

在實際操作中,，凍存細胞要進行復(fù)蘇，再培養(yǎng)傳代,。復(fù)蘇細胞一般采用快速融化法,。以保證細胞外結(jié)晶快速融化，以避免慢速融化水分滲入細胞內(nèi),，再次形成胞內(nèi)結(jié)晶損傷細胞,。

二、細胞復(fù)蘇的主要操作步驟

（1）佩戴眼鏡和手套,，從液氮罐中取出安瓿或冷凍管,。

（2）迅速放入 38℃水浴中，并不時搖動,，在1分鐘內(nèi)使其*融化,，然后在無菌下取出細胞。

（3）在1000r/min速度下離心5～10分鐘,，棄去上層液,，加入適量培養(yǎng)液后接種于培養(yǎng)瓶中，接種濃度1×10⁹/L,，置37℃溫箱靜置培養(yǎng),，次日更換一次培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng),，觀察生長情況,。若細胞密度較高，及時傳代,?；驘o需離心直接將細胞加入瓶中，并加入培養(yǎng)基貼壁培養(yǎng)12～24小時后,，充去上清,，換入新鮮培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。

三,、注意事項

在細胞復(fù)蘇操作時,，應(yīng)注意融化凍存細胞速度要快，可不時搖動安瓿或冷凍管,，使之盡快通過zui易受損的溫度段（-5～0℃）,。這樣復(fù)蘇的凍存細胞存活率高，生長及形態(tài)良好,。然而,，由于凍存的細胞還受其他因素的影響，有時也會有部分細胞死亡。此時,，可將不貼壁,、飄浮在培養(yǎng)液上（已死亡）的細胞輕輕倒掉，再補以適量的新培養(yǎng)液,，也會獲得較為滿意的結(jié)果,。