ATCC原代細胞代購培養(yǎng)

正如人有喜怒哀樂,，細胞也是如此，細胞的活力和狀態(tài)是不斷變化的,，而非一成不變的,。在細胞體外培養(yǎng)的過程中，離開機體保護的細胞是很脆弱的,，在陌生的生長環(huán)境下即便是培養(yǎng)條件的輕微改變,，也可能對細胞產(chǎn)生無法預估的影響。在原代細胞培養(yǎng)過程中,，即使保持培養(yǎng)條件*一致,，在傳代過程中，細胞的存活質(zhì)量也是逐漸下降的,。

ATCC原代細胞代購培養(yǎng)

以人臍靜脈內(nèi)皮細胞（HUVEC細胞）為例,，HUVEC細胞是研究內(nèi)皮細胞功能的經(jīng)典體外細胞模型。在心血管疾病的研究中,，主要用于研究內(nèi)皮細胞功能改變或損傷后其衍生細胞因子對血壓的影響,；在腫瘤研究中，主要用于實體瘤中血管生成的研究,。然而,，HUVEC在傳代培養(yǎng)過程中,，其活力是逐漸衰退的,，因此細胞傳代zui多不超過10代,。

ATCC原代細胞代購培養(yǎng)

傳統(tǒng)的細胞培養(yǎng)主要是通過顯微鏡下形態(tài)學變化以及傳代培養(yǎng)周期的變化預估細胞生長生存狀態(tài)。這種主觀判斷既無法量化,，也無法進行統(tǒng)計學分析,。因此，目前對細胞存活質(zhì)量的判斷并沒有準確,、客觀的統(tǒng)一標準,，并且對體外培養(yǎng)細胞的存活質(zhì)量控制往往被科研工作者們“忽略”，從而導致實驗結果的不穩(wěn)定,。

體外細胞的有效培養(yǎng)新概念——“細胞質(zhì)控”,。通過細胞活力、細胞凋亡,、細胞周期,、細胞增殖及DNA損傷五方面對細胞生長生存狀態(tài)進行的監(jiān)控。

在這五個方面中,，影響zui大的便是細胞活力,，下面咱們專門來談一談細胞活力如何判斷。在體外細胞培養(yǎng)的過程中,，細胞總有一些因各種原因而死亡,，總細胞中活細胞所占的百分比，即是我們常說的細胞活力,。“細胞質(zhì)控”中zui基礎的指標便是細胞活力,。常見的流式細胞設備及部分細胞計數(shù)儀器都可以對細胞進行計數(shù)，還可以提供準確,、客觀的細胞活力數(shù)據(jù),，為“細胞質(zhì)控”提供準確、客觀的統(tǒng)計學依據(jù),，細胞活力評估并不困難,！

只要滿足以下兩個條件就可以進行細胞活力檢測

ü 正常細胞的細胞膜是完整的。Propidium iodide（PI碘化丙啶）是一種核酸染料,，常用于細胞凋亡(apoptosis)或細胞壞死(necrosis)的檢測和流式細胞儀分析,。PI不能通過正常完整的細胞膜，故細胞在處于壞死或晚期凋亡時細胞膜被破壞,，這時可為PI著紅色,，可以用來分辨壞死細胞/正常細胞。

ü 加入另一種可以透過細胞膜的核酸染料,，就可以通過兩種染料將活細胞和死細胞區(qū)分開,。PI經(jīng)常被用來與Calcein-AM或者FDA等熒光探針一起使用，能同時對活細胞和死細胞染色。PI-DNA復合物的激發(fā)和發(fā)射波長分別為535 nm和615 nm,。

細胞活力的技術標準界定

應用案例：納米藥物毒性測試

納米藥物的研究是近年來新藥研發(fā)的熱點,。納米藥物載體篩選的首要標準是檢測其對細胞的毒性。而在細胞毒性測試中,，首先要排除的是基底培養(yǎng)過程中產(chǎn)生的死細胞,，即“噪音信號”。在對新型納米藥物載體SEONLA的研究中,，Zaloga等人認為只有活細胞比例超過90%方可進行細胞毒性研究,，細胞質(zhì)控的重要性由此可見一斑。

細胞毒性的入門級指標是細胞活力,。判斷一種物質(zhì)（化合物,、小分子藥物或蛋白質(zhì)等）對細胞的毒性首先要觀察的是其是否或誘導細胞死亡，即細胞活力的變化,。以維生素C為例,，研究發(fā)現(xiàn)，高濃度維生素C對眼癌細胞Y79 Retinoblastoma Cells具有殺傷作用,。文章中,，作者以眼癌常用化療藥Melphalan作為對照，對經(jīng)過處理的細胞活性進行檢測,，發(fā)現(xiàn),，隨著濃度的升高，維生素C對Y79 Retinoblastoma Cells殺傷作用逐漸增強,，并且維生素C對眼癌細胞的殺傷作用優(yōu)于Melphalan,。這一實驗結果為眼癌更安全、更有效的治療方案的提出提供了理論依據(jù)