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【胎牛血清】
胎牛血清(fetal bovine serum,,F(xiàn)BS)指通過對未出生的胎牛行穿刺采血,,再經(jīng)自然層析,、離心,、過濾等處理而得到的上清液,。在細胞培養(yǎng)體系中,,血清是不屬于人工合成的成分,同時也讓血清成分成為細胞培養(yǎng)體系中最大的不確定因素,,因此,,如何保障胎牛血清的質量是細胞培養(yǎng)得好壞的決定性因素之一,。
【胎牛血清的檢測指標】
胎牛血清的COA中,常規(guī)的檢測標準包括內(nèi)毒素,、總蛋白,、支原體、細菌,、病毒,、滲透壓、總蛋白等,。胎牛血清產(chǎn)品分析證書(COA)就是FBS質控的重要體現(xiàn),。
【理化檢測】
外觀
胎牛血清外觀顏色根據(jù)血紅蛋白含量的不同,呈現(xiàn)出的淺棕色或琥珀色,,優(yōu)質的胎牛血清應該是淺黃色澄清,、無溶血、無異物稍粘稠液體,。但不同批次間的同一款血清,,顏色上也可能存在一定差異。
PH
《中國藥典2020版》中對新生牛血清的標準 pH 值應為7.00~8.50,。藥典中未明確對胎牛血清做出pH 值要求,,行業(yè)內(nèi)均以此為參考。一般采用電位法進行測定,。
滲透壓
滲透壓的檢測一般采用冰點下降法,,滲透壓是為了維持細胞張力,調(diào)節(jié)細胞的代謝,。滲透壓摩爾濃度(mOsmol/kg):250-330之間,。
總蛋白
測量血清中蛋白質總含量可確認動物的年齡及符合產(chǎn)品的規(guī)格,采用的雙縮脲法進行檢測,,該方法實驗反應產(chǎn)生的紫色絡合物顏色的深淺與蛋白質濃度成正比,故可用來測定蛋白質含量,。
血紅蛋白
紅蛋白含量決定血清色澤的因素是血紅蛋白和膽紅素,,前者含量高,則呈現(xiàn)偏紅的顏色,,后者高則呈現(xiàn)為金黃色,。
細菌內(nèi)毒素
內(nèi)毒素會因為啟動補體活性而產(chǎn)生細胞毒性,內(nèi)毒素控制在10EU/ml以內(nèi)符合國家標準,,過高的內(nèi)毒素將會對部分細胞產(chǎn)生刺激作用,,影響細胞生長。
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