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牛血清白蛋白(BSA),,是牛血清中的一種球蛋白,,包含607個氨基酸殘基,分子量為66.446KDa,,等電點為4.7,。牛血清白蛋白在生化實驗中有廣泛的應(yīng)用,。
蛋白質(zhì)——是牛血清中主要成份。除包括可攜帶金屬離子,、脂肪酸和自身是激素類蛋白外主要還有白蛋白,,球蛋白。
多肽——血小板促生長因子能促細胞分裂,,是多肽家庭的主要成員之一,,是主要的促細胞增殖因子;成纖維細胞生長因子,、表皮細胞生長因子,、神經(jīng)細胞生長因子等,血清中含量雖很少,,但對細胞生長也有一定作用,。
激素——胰島素:促進細胞攝取葡萄糖和氨基酸,與促細胞分裂有關(guān),;類胰島素生長因子:能與細胞表達的胰島素受體結(jié)合,,從而有胰島素同樣的作用;促生長激素:促細胞增殖效應(yīng),。
其他成份——氨基酸,、葡萄糖、酮酸等對多種營養(yǎng)成分的合成培養(yǎng)基意義不大,。與蛋白相結(jié)合狀態(tài)的微量元素對細胞培養(yǎng)有意義,。
結(jié)構(gòu)與作用
牛血清中的簡單蛋白,是血液的主要成分(38g/1000ml),,分子量68kD,。等電點4.8。含氮量16%,,含糖量0.08%,。僅含己糖和己糖胺,含脂量只有0.2%,。白蛋白由581個氨基酸殘基組成,,其中35個半胱氨酸組成17個二硫鍵,在肽鏈的第34位有一自由巰基,。白蛋白可與多種陽離子,、陰離子和其他小分子物質(zhì)結(jié)合。血液中的白蛋白主要起維持滲透壓作用,、PH緩沖作用,、載體作用和營養(yǎng)作用。在動物細胞無血清培養(yǎng)中,添加白蛋白可起到生理和機械保護作用和載體作用,。牛血清白蛋白(BSA),,又稱第五組分,是牛血清中的一種球蛋白,,包含583個氨基酸殘基,,分子量為66.430 Da,等電點為4.7,。牛血清白蛋白在生化實驗中有廣泛的應(yīng)用,,例如在wesern blot中作為Blocking agent。
BSA一般做為穩(wěn)定劑被用于限制酶或者修飾酶的保存溶液和反應(yīng)液中,,因為有些酶在低濃度下不穩(wěn)定或活性低,。加入BSA后,它可能起到“保護"或“載體"作用,,不少酶類添加 BSA后能使其活性大幅度提高,。不需要加BSA的酶加入BSA一般不會受到什么影響。對多數(shù)底物DNA而言,,BSA可以使酶切更*,,并可實現(xiàn)重復(fù)切割。在37℃,,酶切反應(yīng)超過1h時,,BSA可以使酶更加穩(wěn)定,因為在不含BSA的反應(yīng)緩沖液中,,許多限制性內(nèi)切酶在37℃下只能存活10"20min甚至更短的時間,。而BSA可以結(jié)合緩沖液或底物DNA中抑制限制性內(nèi)切酶活性的金屬離子和其它化學(xué)物質(zhì)。
牛血清白蛋白(BSA)的用途如下:
1,、用于生化研究,、遺傳工程和醫(yī)藥研究
2、用作醫(yī)藥保健食品,、調(diào)味品
3,、維持滲透壓、pH緩沖,、載體作用
4,、在PCR體系中有助于Taq酶的穩(wěn)定性及活性,,可以提高PCR的效率
BSA的應(yīng)用
牛血清白蛋白(BSA)在生化實驗中有廣泛的應(yīng)用, 例如在WB實驗中加入BSA, 通過提高溶液中蛋白質(zhì)的濃度,對酶起保護作用,。防止酶的分解和非特異性吸附,,能減輕有些酶的變性,減輕不利環(huán)境因素如加熱,表面張力及化學(xué)因素引起的變性的,。
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