一,、斜面培養(yǎng)基移種技術(shù)

(1)材料

瓊脂斜面培養(yǎng)基

經(jīng)分離培養(yǎng)的平板培養(yǎng)物。

(2)方法

①在瓊脂斜面培養(yǎng)基試管上部標(biāo)明移種的菌名(或編號(hào)),、接種日期,、接種者的組別及代號(hào)。

②左手持長(zhǎng)有細(xì)菌的平板底,，右手持接種環(huán),。接種環(huán)在火焰上滅菌冷卻后，沾取平板劃線上發(fā)育良好的孤立菌落,。把平板放回原處,，立即用此手取斜面培養(yǎng)基斜持，用右手小指與手掌夾持棉塞,，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)后撥出棉塞,，管口通過火焰滅菌。

③將已沾菌的接種環(huán)伸入斜面培養(yǎng)基的管底部的凝固水,，沿斜面培養(yǎng)基的表面從底向上劃一直線,，然后再?gòu)牡撞肯蛏蟿澾B續(xù)曲折線；也可不劃直線只劃曲折線,。取出接種環(huán),，管口通過火焰滅菌，塞好棉塞,，放試管架上,，接種環(huán)火焰滅菌后放下。

向斜面培養(yǎng)基上移種的細(xì)菌如果是生長(zhǎng)在斜面培養(yǎng)基上的，或是生長(zhǎng)在液體培養(yǎng)基中的,，則用左手同時(shí)斜持菌種管和斜面培養(yǎng)基兩個(gè)管,，右手無名指、小指手掌同時(shí)拔起夾持二個(gè)棉塞,。管口及接種環(huán)先經(jīng)火焰滅菌后,，從菌種管取菌立即移種到斜面上，塞好棉塞,，接種環(huán)火焰滅菌后放下,。然后將斜面培養(yǎng)基放37℃恒溫箱中培養(yǎng)24h。結(jié)果斜面表面形成菌苔,。

二,、液體培養(yǎng)基移種技術(shù)

用于純種細(xì)菌的增菌及觀察細(xì)菌在液體環(huán)境中的生長(zhǎng)特征(混濁生長(zhǎng)，表面生長(zhǎng)或沉淀生長(zhǎng))

(1)材料

肉湯培養(yǎng)基

斜面培養(yǎng)物(大腸埃希菌,、化膿性鏈球菌,、枯草芽胞桿菌)

(2)方法

①取接種環(huán)在火焰上灼燒滅菌、冷卻,。

②以“雙管移植法"左手持細(xì)菌斜面培養(yǎng)物和肉湯培養(yǎng)基兩支試管，右手持接種環(huán),，按無菌操作法取少量細(xì)菌,，將沾菌的接種環(huán)在斜傾的接近液面的管壁上輕輕涂抹研勻，試管直立使沾附在管壁上的細(xì)菌沒入液體中,，接種后放37℃恒溫箱中培養(yǎng),。

(3)結(jié)果

①渾濁生長(zhǎng)大腸埃希菌菌液呈均勻混濁，管底有少量沉淀,。

②沉淀生長(zhǎng)化膿性鏈球菌菌液管底有沉淀,，菌液無明顯渾濁。

③菌膜生長(zhǎng)枯草芽胞桿菌菌液表面形成膜狀物,。

三,、半固體培養(yǎng)基移種技術(shù)

用于保存菌種及間接檢查細(xì)菌有無動(dòng)力。

(1)材料

半固體培養(yǎng)基,。

細(xì)菌斜面培養(yǎng)物,。

(2)方法

①將接種針經(jīng)火焰滅菌冷卻后，從斜面培養(yǎng)物表面沾取細(xì)菌,。

②用無菌法穿刺接種,，將接種針刺入半固體培養(yǎng)基正中央，深度達(dá)距管底0.5cm處停止,，然后循原路退出,。注意在刺入及拔出時(shí)要保持接種針不向穿刺線外擺動(dòng)。

③試管口通過火焰滅菌，塞上棉塞,。接種針經(jīng)火焰滅菌,。培養(yǎng)物放37℃恒溫箱中培養(yǎng)。

(3)結(jié)果：有動(dòng)力的細(xì)菌呈擴(kuò)散生長(zhǎng),，無動(dòng)力的細(xì)菌沿穿刺線生長(zhǎng),。