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為什么你的細(xì)胞生長緩慢,?

時間:2022-3-4閱讀:888

細(xì)胞生長緩慢的常見原因:

    (1)培養(yǎng)基可能缺乏細(xì)胞生長所需的某種因子,。

    通常情況下,當(dāng)小伙伴購買細(xì)胞,,并沒有按照ATCC或國內(nèi)細(xì)胞庫推薦的方法制備培養(yǎng)基,,使用實驗室兄弟姐妹使用的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。解決方法一般是按照推薦的方法制備培養(yǎng)基,,或直接購買培養(yǎng)細(xì)胞的培養(yǎng)基,。(B)細(xì)菌、支原體,、真菌等污染:雖然培養(yǎng)基中通常添加雙抗體(青霉素和鏈霉素),,但如果無菌操作觀念不強,仍有可能造成污染,。處理方法:如果有冷凍細(xì)胞,,可以丟棄污染細(xì)胞。當(dāng)然,,丟棄并不是隨意的,,扔進(jìn)垃圾桶,。應(yīng)按照實驗室生物安全規(guī)定進(jìn)行。然后復(fù)蘇培養(yǎng)物,,建議培養(yǎng)箱*消毒,。

如果不冷凍,而且這種細(xì)胞非常珍貴,,常用的治療方法是藥物治療:細(xì)菌污染加5-10倍的抗生素;真菌污染加抗真菌藥物;支原體污染再加上抗支原體藥物,,具體藥物可以咨詢技術(shù)支持,他們會更加專業(yè),。

    (C)許多細(xì)胞的生長依賴于密度,。如果傳代后細(xì)胞密度過小,也會影響細(xì)胞生長,。這段時間沒有什么特別好的,,就是更換液體。如果細(xì)胞培養(yǎng)瓶為T75,,則可以消化,、離心、復(fù)蘇,,然后接種到T25瓶中,。

    (4)冷凍細(xì)胞中添加DMSO(二甲基亞砜)的量不正確,沒有逐漸梯度冷卻,。下一次恢復(fù)后的細(xì)胞總是壞的,。處理方法:按推薦的冷凍保存方法制備冷凍液。部分細(xì)胞適合10% DMSO,,部分細(xì)胞適合5% DMSO;嚴(yán)格遵循漸變冷卻的原則,,細(xì)胞恢復(fù)后迅速解凍。

    (5)換液間隔時間太長,。一些小伙伴真的把細(xì)胞“佛"系生長,。當(dāng)他們想到它的時候,才會換下液體,,相信一個句子,。“你已經(jīng)是一個成熟的細(xì)胞了,。你應(yīng)該學(xué)會養(yǎng)活自己,,成長"。在這種情況下,,細(xì)胞培養(yǎng)瓶中積累了大量的細(xì)胞代謝廢物,,影響細(xì)胞活性。推薦:勤奮點

    (6)細(xì)胞的“消化"時間不宜過長,,減少對細(xì)胞的損傷;此外,,EDTA一般添加到胰腺酶中,,螯合鈣離子,影響細(xì)胞粘附,。治療方法:控制細(xì)胞“消化"時間,,盡量去除干凈的胰蛋白酶和EDTA。

    PH值:細(xì)胞需要在一定的PH值下生長,,這個小朋友知道,。但是很多時候PH值是我們忽略的東西,這也是想強調(diào)的一點,。隨著使用時間的增加,,我們使用的介質(zhì)可能會慢慢變成堿性!(當(dāng)然,,它也可能變酸,,但改變堿是常見的)。一般來說,,過堿的培養(yǎng)基會影響細(xì)胞的生長,。治療:簡單的方法就是更換新鮮的培養(yǎng)基!當(dāng)然,如果你有時間和條件,,你可以調(diào)整介質(zhì)的pH值,。

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