胎牛血清
 

　　血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復雜的混合物,，其組成成份雖大部分已知，但還有一部分尚不清楚,，且血清組成及含量常隨供血動物的性別,、年齡、生理條件和營養(yǎng)條件不同而異,。血清中含有各種血漿蛋白,、多肽、脂肪,、碳水化合物,、生長因子、激素,、無機物等,，這些物質(zhì)對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的。
 

　　胎牛血清應(yīng)取自剖腹產(chǎn)的胎牛;新牛血清取自出生24小時之內(nèi)的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛,。胎牛血清是品質(zhì)高的,，因為胎牛還未接觸外界，血清中所含的抗體,、補體等對細胞有害的成分最少,。
 

　　胎牛血清要求：
 

　　1、性狀,、外觀：淺黃色澄清,、無溶血、無異物稍粘稠液體,。
 

　　2,、蛋白質(zhì)含量：3.5%~5.0%( w/v)
 

　　3、血紅蛋白含量：≤ 0.02%( w/v)
 

　　4,、無菌檢驗：陰性
 

　　5,、支原體檢驗：陰性
 

　　6、細菌內(nèi)毒素：≤5(EU/ml)
 

　　7,、牛腹瀉病毒：陰性
 

　　8,、大腸桿菌噬菌體：陰性
 

　　9、支持細胞增殖：(Sp2/0-Ag14) 生長曲線 (接種濃度)最大增殖濃度 ≥2.5×106個/ml，細胞倍增時間：≤15h,，克隆率：≥85%
 

　　胎牛血清功能
 

　　牛血清是細胞培養(yǎng)中用量最大的天然培養(yǎng)基,，含有豐富的細胞生長必需的營養(yǎng)成份，常用于動物細胞的體外培養(yǎng),，具有極為重要的功能,。
 

　　1.提供對維持細胞指數(shù)生長的激素，基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,，以及主要的低分子營養(yǎng)物,。
 

　　2. 提供結(jié)合蛋白，能識別維生素,、脂類,、金屬和其他激素等，能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力,。
 

　　3.有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,，起到解毒作用。
 

　　4.是細胞貼壁,、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來源,。
 

　　5.起酸堿度緩沖液作用,。
 

　　6.提供蛋白酶抑制劑,，使在細胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活，保護細胞不受傷害,。
 

　　胎牛血清的評估標準
 

　　胎牛血清(FBS)是常用的血清添加劑,，因為它富含生長因子,、蛋白和大分子。盡管無血清和非動物來源的培養(yǎng)基也逐漸走紅,，但許多細胞系未必適用,，并且存在費用較高和生長較慢等缺點。那么,，研究人員在評估FBS的質(zhì)量時,，需要考慮哪些標準呢？
 

　　對于細胞培養(yǎng)而言,，血清的重要性不言而喻。它含有蛋白,、生長因子,、氨基酸、脂類,、碳水化合物,、維生素及其他組分，可以促進貼壁或懸浮細胞的生長和維持。胎牛血清(FBS)是常用的血清添加劑,，因為它富含生長因子,、蛋白和大分子。盡管無血清和非動物來源的培養(yǎng)基也逐漸走紅,，但許多細胞系未必適用,，并且存在費用較高和生長較慢等缺點。
 

　　目前,，市場上存在著不同等級的FBS,。由于FBS關(guān)乎細胞活力和實驗重復性等重要的參數(shù)，故在質(zhì)量方面是絕對不能含糊的,。若質(zhì)量不穩(wěn)定,，則有可能導致實驗失敗。那么,，研究人員在評估FBS的質(zhì)量時,，需要考慮哪些標準呢？
 

　　1.可追溯性
 

　　對于科學家而言,，最大的風險也許是FBS的純度大打折扣,，這可能導致細胞培養(yǎng)實驗的效果不佳。許多FBS的賣家與多個產(chǎn)地簽訂短期供應(yīng)協(xié)議來采集原材料,，以便降低成本,。他們將這些產(chǎn)品混合，稀釋不同來源的影響,。然而,，最終結(jié)果就是質(zhì)量不穩(wěn)定，產(chǎn)品供應(yīng)和價格出現(xiàn)波動,。
 

　　針對這一問題,，國際血清行業(yè)協(xié)會(ISIA)實施了供應(yīng)鏈可追溯性的行業(yè)標準，這對確保FBS各個批次的質(zhì)量,、安全性和重復性起了關(guān)鍵作用,。一些公司提供化學分析，說明原產(chǎn)國的統(tǒng)計概率,。也許好的方法是追溯到動物,，以確保產(chǎn)品的來源。
 

　　FBS的供應(yīng)商是否在整個供應(yīng)鏈中都保留原產(chǎn)地的可追溯記錄,？他們是否持有文件,，支持各個階段的處理、運輸和商業(yè)交易,？他們能否展示*來源的可追溯性,，以確保重復性和低病毒風險,？在考慮購買FBS時，這都是你需要考慮的問題,。
 

　　地域性風險評估(GBR)是定性評估一個國家或地區(qū)的動物感染疾病(如瘋牛病)的可能性,。這種方法依賴世界動物衛(wèi)生組織(OIE)的監(jiān)控系統(tǒng)，將每個國家或地區(qū)的瘋牛病風險進行分類,。OIE評估各個國家的獸醫(yī)服務(wù),、疾病診斷能力、覺察癥狀能力及其他因素,，以避免瘋牛病的傳播,。
 

　　新西蘭和澳大利亞都獲得了GBR 1級，這意味著它們目前是沒有瘋牛病和口蹄疫的,。這兩個國家都是出了名的病毒風險低的國家,。由于環(huán)境受到保護，以及嚴格的農(nóng)業(yè)法規(guī)和入境要求,，再加上它們都是島國,，動物們不太可能受到其他地區(qū)疾病的影響。這對于那些敏感的細胞系和實驗而言特別有用,。對科學家來說,，好處是花在重復實驗或檢驗新批次上的時間將大大減少。
 

　　2.質(zhì)量
 

　　對血清而言,，產(chǎn)品質(zhì)量尤為關(guān)鍵,。由美國食品和藥品管理局(FDA)執(zhí)行的cGMP規(guī)范建立了完整體系，以確保制造過程和工廠的正確設(shè)計,、監(jiān)控和控制,。在購買血清時，你最好選擇遵從cGMP規(guī)范的供應(yīng)商,，以便降低產(chǎn)品混合和標簽錯誤的風險,。
 

　　確保各批次一致性還涉及其他因素，包括牛群環(huán)境,、食物來源以及質(zhì)量控制檢測程序,。正確采集血清，才能保證它天然的促進生長特性,，并實現(xiàn)FBS產(chǎn)品的出色表現(xiàn),。當然，這些資料收集起來可不容易,，那么你可以依靠國際機構(gòu)(如FDA,、USDA、AQIS等行業(yè)協(xié)會)的認證,，來尋找理想的供應(yīng)商。
 

　　3.價格
 

　　有時，F(xiàn)BS的價格會大幅波動,，這取決于許多因素,。作為肉類行業(yè)的副產(chǎn)品，F(xiàn)BS的生產(chǎn)在本質(zhì)上會受到天氣和食物供應(yīng),、經(jīng)濟條件和牛群規(guī)模等各種因素的影響,。如果病毒不定期再來搗亂一下，那么牛的數(shù)量必然下降,，F(xiàn)BS的供應(yīng)也勢必減少,。此外，由于干旱導致奶牛飼養(yǎng)費用較高,，農(nóng)民可能會將牛賣掉或屠宰,，導致牛群數(shù)量下降。
 

　　值得一提的是,，世界對FBS的需求還在不斷增加,。每年，全球大約生產(chǎn)600,000 L的FBS,，其中cGMP等級的不足200,000 L,，而后者正是大多數(shù)工業(yè)生產(chǎn)公司的要求。隨著大型制藥公司的需求上升,，F(xiàn)BS的價格也在持續(xù)上漲,。此時，找到一家可以提供同批次FBS的供應(yīng)商是十分必要的,，這既確保了產(chǎn)品供應(yīng),，也在一定程度上避免價格波動。
 

　　4.檢測
 

　　定期的產(chǎn)品檢測當然也不能少,。大家應(yīng)注意產(chǎn)品的供應(yīng)商是否定期進行生化,、激素、病毒和功能方面的檢測,，包括檢測細菌,、病毒及其他微生物是否存在，以確保產(chǎn)品經(jīng)過全面鑒定,。質(zhì)量控制檢測也應(yīng)當開展,，以確保血清產(chǎn)品始終符合規(guī)定并合乎規(guī)格。
 

　　總的來說,，F(xiàn)BS及其他血清有可能大大影響細胞培養(yǎng)工作的質(zhì)量和重復性,。因此，在購買過程中,，我們有必要對FBS的身世,、質(zhì)量以及質(zhì)檢過程做到心中有數(shù),，而不僅僅被價格所左右，這樣才能改善實驗結(jié)果,，節(jié)省寶貴時間