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CAL-148細(xì)胞,,CAL-148細(xì)胞株的復(fù)蘇方法
產(chǎn)品名稱:CAL-148細(xì)胞
中文名稱:導(dǎo)管癌細(xì)胞
貨號(hào):CAL-148
規(guī)格:1~3*106細(xì)胞/25cm2培養(yǎng)瓶
上海蒂科生物 細(xì)胞株,、血清,、培養(yǎng)基,、 各種細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)試劑,開學(xué)酬賓*中,,更多產(chǎn)品,,更大優(yōu)惠,敬請(qǐng)??!
1.預(yù)熱培養(yǎng)用液把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,。
2.用75酒精擦拭經(jīng)過(guò)紫外線照射的超凈工作臺(tái)和雙手,。
3.正確擺放使用的器械保證足夠的操作空間不僅便于操作而且可減少污染。
4.點(diǎn)燃酒精燈注意火焰不能太小,。
5.準(zhǔn)備好將要使用的消毒后的空培養(yǎng)瓶放入微波爐內(nèi)高火8分鐘再次消毒,。
6.取出預(yù)熱好的培養(yǎng)用液取出已經(jīng)預(yù)熱好的培養(yǎng)用液用酒精棉球擦拭好后方能放入超凈臺(tái)內(nèi)。
7.從培養(yǎng)箱內(nèi)取出細(xì)胞注意取出細(xì)胞時(shí)要旋緊瓶蓋用酒精棉球擦拭顯微鏡的臺(tái)面再在鏡下觀察細(xì)胞,。
8.打開瓶口將各瓶口一一打開同時(shí)要在酒精燈上燒口消毒,。
二.胰蛋白酶消化
1.加入消化液小心吸出舊培養(yǎng)液用PBS清洗沖洗加入適量消化液胰蛋白酶液注意消化液
的量以蓋住細(xì)胞*消化溫度是37℃,。
2. 顯微鏡下觀察細(xì)胞倒置顯微鏡下觀察消化細(xì)胞若胞質(zhì)回縮細(xì)胞之間不再連接成片表明此時(shí)細(xì)胞
消化適度。
3.吸棄消化液加入培養(yǎng)液棄去胰蛋白酶液注意更換吸管加入新鮮的培養(yǎng)液,。
三.吹打分散細(xì)胞
1.吹打制懸用滴管將已經(jīng)消化細(xì)胞吹打成細(xì)胞懸液,。
2.吸細(xì)胞懸液入離心管將細(xì)胞懸液吸入10ml離心管中。1.預(yù)熱培養(yǎng)用液把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液,、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,。
2.用75酒精擦拭經(jīng)過(guò)紫外線照射的超凈工作臺(tái)和雙手。
3.正確擺放使用的器械保證足夠的操作空間不僅便于操作而且可減少污染,。
4.點(diǎn)燃酒精燈注意火焰不能太小,。
5.準(zhǔn)備好將要使用的消毒后的空培養(yǎng)瓶放入微波爐內(nèi)高火8分鐘再次消毒。
6.取出預(yù)熱好的培養(yǎng)用液取出已經(jīng)預(yù)熱好的培養(yǎng)用液用酒精棉球擦拭好后方能放入超凈臺(tái)內(nèi),。
7.從培養(yǎng)箱內(nèi)取出細(xì)胞注意取出細(xì)胞時(shí)要旋緊瓶蓋用酒精棉球擦拭顯微鏡的臺(tái)面再在鏡下觀察細(xì)胞,。
8.打開瓶口將各瓶口一一打開同時(shí)要在酒精燈上燒口消毒。
二.胰蛋白酶消化
1.加入消化液小心吸出舊培養(yǎng)液用PBS清洗沖洗加入適量消化液胰蛋白酶液注意消化液
的量以蓋住細(xì)胞*消化溫度是37℃,。
2. 顯微鏡下觀察細(xì)胞倒置顯微鏡下觀察消化細(xì)胞若胞質(zhì)回縮細(xì)胞之間不再連接成片表明此時(shí)細(xì)胞
消化適度,。
3.吸棄消化液加入培養(yǎng)液棄去胰蛋白酶液注意更換吸管加入新鮮的培養(yǎng)液。
三.吹打分散細(xì)胞
1.吹打制懸用滴管將已經(jīng)消化細(xì)胞吹打成細(xì)胞懸液,。
2.吸細(xì)胞懸液入離心管將細(xì)胞懸液吸入10ml離心管中,。1.預(yù)熱培養(yǎng)用液把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,。
2.用75酒精擦拭經(jīng)過(guò)紫外線照射的超凈工作臺(tái)和雙手,。
3.正確擺放使用的器械保證足夠的操作空間不僅便于操作而且可減少污染。
4.點(diǎn)燃酒精燈注意火焰不能太小,。
5.準(zhǔn)備好將要使用的消毒后的空培養(yǎng)瓶放入微波爐內(nèi)高火8分鐘再次消毒,。
6.取出預(yù)熱好的培養(yǎng)用液取出已經(jīng)預(yù)熱好的培養(yǎng)用液用酒精棉球擦拭好后方能放入超凈臺(tái)內(nèi)。
7.從培養(yǎng)箱內(nèi)取出細(xì)胞注意取出細(xì)胞時(shí)要旋緊瓶蓋用酒精棉球擦拭顯微鏡的臺(tái)面再在鏡下觀察細(xì)胞,。
8.打開瓶口將各瓶口一一打開同時(shí)要在酒精燈上燒口消毒,。
二.胰蛋白酶消化
1.加入消化液小心吸出舊培養(yǎng)液用PBS清洗沖洗加入適量消化液胰蛋白酶液注意消化液
的量以蓋住細(xì)胞*消化溫度是37℃。
2. 顯微鏡下觀察細(xì)胞倒置顯微鏡下觀察消化細(xì)胞若胞質(zhì)回縮細(xì)胞之間不再連接成片表明此時(shí)細(xì)胞
消化適度,。
3.吸棄消化液加入培養(yǎng)液棄去胰蛋白酶液注意更換吸管加入新鮮的培養(yǎng)液,。
三.吹打分散細(xì)胞
1.吹打制懸用滴管將已經(jīng)消化細(xì)胞吹打成細(xì)胞懸液。
2.吸細(xì)胞懸液入離心管將細(xì)胞懸液吸入10ml離心管中,。
3.平衡離心平衡后將離心管放入臺(tái)式離心機(jī)中以1000轉(zhuǎn)/分鐘離心6-8分鐘,。
4.棄上清液加入新培養(yǎng)液棄去上清液加入2ml培養(yǎng)液用滴管輕輕吹打細(xì)胞制成細(xì)胞懸液。
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