Alexander cells細胞的復蘇方法

產(chǎn)品名稱：Alexander cells細胞

中文名稱：肝癌細胞

貨號：Alexander cells

規(guī)格：1~3*106細胞/25cm2培養(yǎng)瓶

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一、細胞復蘇的原則

在實際操作中,，凍存細胞要進行復蘇,，再培養(yǎng)傳代,。復蘇細胞一般采用快速融化法。以保證細胞外結(jié)晶快速融化,，以避免慢速融化水分滲入細胞內(nèi),，再次形成胞內(nèi)結(jié)晶損傷細胞。

二,、細胞復蘇的主要操作步驟

（1）佩戴眼鏡和手套,，從液氮罐中取出安瓿或冷凍管,。

（2）迅速放入 38℃水浴中,，并不時搖動,，在1分鐘內(nèi)使其*融化,，然后在無菌下取出細胞,。

（3）在1000r/min速度下離心5～10分鐘,，棄去上層液,，加入適量培養(yǎng)液后接種于培養(yǎng)瓶中,，接種濃度1×10⁹/L,，置37℃溫箱靜置培養(yǎng),，次日更換一次培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng),，觀察生長情況,。若細胞密度較高，及時傳代,?；驘o需離心直接將細胞加入瓶中，并加入培養(yǎng)基貼壁培養(yǎng)12～24小時后,，充去上清,，換入新鮮培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。

三,、注意事項

在細胞復蘇操作時,，應注意融化凍存細胞速度要快，可不時搖動安瓿或冷凍管,，使之盡快通過zui易受損的溫度段（-5～0℃）,。這樣復蘇的凍存細胞存活率高，生長及形態(tài)良好,。然而,，由于凍存的細胞還受其他因素的影響，有時也會有部分細胞死亡,。此時,，可將不貼壁、飄浮在培養(yǎng)液上（已死亡）的細胞輕輕倒掉，再補以適量的新培養(yǎng)液,，也會獲得較為滿意的結(jié)果,。