A-704細(xì)胞A-704細(xì)胞株的復(fù)蘇方法

產(chǎn)品名稱：A-704細(xì)胞

中文名稱：腎細(xì)胞癌細(xì)胞

貨號：A-704

規(guī)格：1~3*106細(xì)胞/25cm2培養(yǎng)瓶

上海蒂科生物 細(xì)胞株,、血清,、培養(yǎng)基,、 各種細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)試劑,，開學(xué)酬賓*中，更多產(chǎn)品,，更大優(yōu)惠,，敬請！,！

一,、細(xì)胞復(fù)蘇的原則

在實際操作中，凍存細(xì)胞要進行復(fù)蘇,，再培養(yǎng)傳代,。復(fù)蘇細(xì)胞一般采用快速融化法。以保證細(xì)胞外結(jié)晶快速融化,，以避免慢速融化水分滲入細(xì)胞內(nèi)，再次形成胞內(nèi)結(jié)晶損傷細(xì)胞,。

二,、細(xì)胞復(fù)蘇的主要操作步驟

（1）佩戴眼鏡和手套，從液氮罐中取出安瓿或冷凍管,。

（2）迅速放入 38℃水浴中,，并不時搖動，在1分鐘內(nèi)使其*融化,，然后在無菌下取出細(xì)胞,。

（3）在1000r/min速度下離心5～10分鐘，棄去上層液,，加入適量培養(yǎng)液后接種于培養(yǎng)瓶中,，接種濃度1×10⁹/L，置37℃溫箱靜置培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液,，繼續(xù)培養(yǎng),，觀察生長情況。若細(xì)胞密度較高,，及時傳代,。或無需離心直接將細(xì)胞加入瓶中,，并加入培養(yǎng)基貼壁培養(yǎng)12～24小時后,，充去上清，換入新鮮培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),。

三,、注意事項

在細(xì)胞復(fù)蘇操作時，應(yīng)注意融化凍存細(xì)胞速度要快,，可不時搖動安瓿或冷凍管,，使之盡快通過zui易受損的溫度段（-5～0℃）。這樣復(fù)蘇的凍存細(xì)胞存活率高,，生長及形態(tài)良好,。然而，由于凍存的細(xì)胞還受其他因素的影響,，有時也會有部分細(xì)胞死亡,。此時，可將不貼壁,、飄浮在培養(yǎng)液上（已死亡）的細(xì)胞輕輕倒掉,，再補以適量的新培養(yǎng)液，也會獲得較為滿意的結(jié)果,。