血清

細胞培養(yǎng)液中添加的血清有牛血清,，馬血清,，人血清等，其中牛血清是zui常用的血清,，分為胎牛血清和新勝小牛血清,。胎牛血清是從母牛破腹取出的胎牛中分離出的血清，價格昂貴,。新生小牛血清是從剛出生的尚未哺乳的小牛中分離出來的血清,，如廠家能做到這一點，新生小牛血清的質量與胎牛血清的質量相差不大,。如小牛出生后已哺乳,，從這種小牛中取出的血清中可能含有較多的生物活性物質，其質量明顯不如前兩張,。

血清的質量,，種類及使用的濃度都有可能影響的細胞生長，而不同批次的血清支持細胞生長的能力也不同,，尤其是對克隆細胞的生長,，某些批次血清可能含有毒性或抑制細胞生長的物質。因此,，在購買大量血清之前,，必須對血清支持細胞生長能力進行檢測,，然后在大量購買質量好的同一批號的血清,，并注意以下幾點：

（1）需要長期保存的血清必須儲存于-20℃ -70℃低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時間切勿超過1個月,。由于血清結冰時體積會增加10%,，因此，血清在凍入低溫冰箱前,，必須預留一定體積空間,，否則易發(fā)生污染或玻璃瓶凍裂。

（2）一般廠商提供的血清為無菌,，無需再過濾除菌,。如發(fā)現血清有懸浮物,，則可將血清加入培養(yǎng)基一起過濾，切勿直接過濾血清,。

（3）瓶裝血清解凍需采用逐步解凍法：-20℃至-70℃低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解一天,。然后移入室溫，待全部溶解后在分裝,。在溶解過程中需不斷輕輕搖晃均勻（小心勿造成氣泡）,，使溫度與成分均一，減少沉淀的發(fā)生,。切勿直接將血清從-20℃進入37℃解凍,，這樣溫度改變太大，容易造成蛋白凝集而出現沉淀,。

（4）熱滅活是指56℃,，30分鐘加熱已*解凍的血清.加熱過程中須規(guī)則搖晃均勻。此熱處理的目的是使用血清中的補體成分（comp l ement）滅活,。除非必須,，一般不建議作此熱處理，因為熱處理會造成血清沉淀物顯著增多,，而且還會影響血清的質量.補體參與反應有：細胞毒作用,，平滑肌細胞收縮，肥大細胞和血小板釋放組胺,，增強吞噬作用,，促進淋巴細胞和巨吞噬細胞發(fā)生化學趨化和活化。

（5）切勿將血清在37℃放置太久,，否則血清會變得渾濁,，同時血清中的有效成分會破會而影響血清質量。

（6）血清中的沉淀物絮狀物：主要是血清中的脂蛋白變性及解凍后血清纖維蛋白造成,，這些絮狀物不會影響血清本身的質量,。可用離心3000rpm,，5分鐘去除,，也可不用處理。

顯微鏡下“小黑點”：經過熱處理的血清,，沉淀物的形成會顯著增多,。有些沉淀物在顯微鏡下觀察像“小黑點”，常誤認為血清受污染,。一般情況下,，此小黑點不會影響細胞生長，但如果懷疑血清質量，則應立即停止使用,，更換另一批號血清,。