上海蒂科生物  生物試劑一站式采購  培養(yǎng)基等產(chǎn)品  歡迎您致電咨詢

細(xì)胞培養(yǎng)基的種類很多,，按其來源分為合成培養(yǎng)基和天然培養(yǎng)基（目前使用的培養(yǎng)基絕大部分是合成培養(yǎng)基）,，按其物質(zhì)狀態(tài)分為干粉培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基兩類。干粉培養(yǎng)基需要實(shí)驗(yàn)者自己配制并滅菌,，液體培養(yǎng)基由專業(yè)商家提供，用戶可直接使用,，非常方便,。

1,，合成培養(yǎng)基的主要成分有：氨基酸，碳水化合物,，無機(jī)鹽，維生素及其他輔助位置：

氨基酸

氨基酸是組成蛋白質(zhì)的基本單位,。不同種類的細(xì)胞對氨基酸的要求各異,，但有幾種氨基酸細(xì)胞自身不能合成,，必須依靠培養(yǎng)液提供，這幾種氨基酸稱為必需氨基酸,。其中谷氧酰胺是細(xì)胞合成核酸和蛋白質(zhì)必須的氨基酸，在缺少谷氧酰胺時(shí),，細(xì)胞生長不良而死亡。因此,，各種培養(yǎng)液中都有較大量的的谷氧酰胺,。但是,，由于谷氧酰胺在溶液中很不穩(wěn)定,，應(yīng)置于-20℃冰箱中保存，在使用前加入培養(yǎng)液內(nèi),。已含谷氧酰胺得培養(yǎng)液在4℃冰箱中儲存兩周以上時(shí),，還應(yīng)重新加入原來量的谷氧酰胺,。

碳水化合物

碳水化合物是細(xì)胞生長主要能量來源，其中有的是合成蛋白質(zhì)和核酸的成分,。主要有葡萄糖，核糖,，脫氧核糖,，丙酮酸鈉和醋酸等.

無機(jī)鹽

培養(yǎng)液中無機(jī)鹽的主要功能是幫助細(xì)胞維持滲透壓平衡,。此外，通過提供鈉,，鉀和鈣離子，幫助細(xì)胞調(diào)節(jié)細(xì)胞膜功能,。培養(yǎng)液的滲透壓是一個(gè)非常重要的因素，細(xì)胞通?？赡褪?60m0sm/kg～320m0sm/kg。標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)液的滲透壓在此范圍內(nèi)波動,。特別注意：向培養(yǎng)液中加入其他物質(zhì)有可能會明顯改變培養(yǎng)液的滲透壓，特別是溶于強(qiáng)酸或強(qiáng)堿中的物質(zhì),。向培養(yǎng)液中添加HEPES時(shí)需按以下方法調(diào)節(jié)鈉離子濃度。

緩沖系統(tǒng)

大多數(shù)細(xì)胞所需pH在7.2-7.4.但是,，細(xì)胞培養(yǎng)zui適pH值隨培養(yǎng)的細(xì)胞種類不同而不同。成成纖維細(xì)胞喜歡較高pH（7.4-7.7）而傳代轉(zhuǎn)化細(xì)胞系則需要偏酸pH（7.0-7.4）,。

由于多數(shù)培養(yǎng)液靠碳酸氫鈉（NaHC03）與C02體系進(jìn)行緩沖，因此氣相中的C02濃度應(yīng)與培養(yǎng)液中碳酸氫鈉濃度相平衡,。如果氣相或培養(yǎng)箱空氣中C02濃度設(shè)定在5%，培養(yǎng)液中NaHC03的加入量為1.97g/L;如果C02濃度維持在10%,，培養(yǎng)液中NaHC03的加入量為3.95g/L。

細(xì)胞培養(yǎng)瓶蓋不應(yīng)該擰得太緊,，以保證氣體交換。HEPES是一種非離子緩沖液,，在pH7.2-7.4范圍內(nèi)具有較好的緩沖能力，但是非常昂貴,，在高濃度時(shí)對一些細(xì)胞可能有毒。HEPES緩沖液可與低水平的碳酸鈉（0.34g/L）共用，以抵消因2額外加入HEPES引起的滲透壓增加,。在這種培養(yǎng)條件下,，細(xì)胞培養(yǎng)瓶的蓋子應(yīng)擰緊,，以防止培養(yǎng)液中所需的少量碳酸鹽散入空氣中。大多數(shù)培養(yǎng)液中含有酚紅作為pH指示劑,，酸性培養(yǎng)液呈橙黃色，堿性培養(yǎng)液呈深紅色,。

維生素

在細(xì)胞培養(yǎng)中,，盡管血清是維生素重要來源,，但是許多培養(yǎng)基中添加了各種維生素以適合更多的細(xì)胞系生長。

其他成分

有一些較為復(fù)雜的培養(yǎng)液中還包括其他一些成分,。如在雜交瘤技術(shù)中常用的DMEM培養(yǎng)液，使用時(shí)還需要補(bǔ)加丙酮酸鈉和2-疏基乙醇（2-Mercaptoethanol,，2-Me）對細(xì)胞生長有很重要的作用,。有人認(rèn)為它相當(dāng)于胎牛血清,，有直接刺激細(xì)胞增殖作用。2-Me的活性部分是硫氧基,，其中一個(gè)重要的作用是使血清中的含硫的化合物還原成谷胱甘肽，能誘導(dǎo)細(xì)胞增殖,，為非特異性的激活作用,。同時(shí)避免過氧化物對培養(yǎng)細(xì)胞的損害,。另一個(gè)重要作用是促進(jìn)分裂原的反應(yīng)和DNA合成，增加植物凝集素（PHA）對淋巴細(xì)胞的轉(zhuǎn)化作用,，已廣泛應(yīng)用于雜交瘤技術(shù)，另外,，也開始用于一些難以培養(yǎng)的細(xì)胞。2-Me是一種小分子還原劑，極易氧化,。分子量為78.13,，純的2-Me是無色有刺激味的液體,，比重為10110-1.120（Do20），常用終濃度為5×10-5M,。常配制成0.1M的儲存液,，用時(shí)每升培養(yǎng)液加0.5ml,。

液體培養(yǎng)基保存：

液體培養(yǎng)基應(yīng)于4℃冰箱避光保存，實(shí)驗(yàn)前放入37℃預(yù)熱,。未加血清液體培養(yǎng)基有效期為12個(gè)月,。液體培養(yǎng)基中的L-谷氧酰胺會隨著儲存時(shí)間的延長而慢慢分解。如果細(xì)胞生長不良,，可以再添加適量L-谷氧酰胺,。

干粉培養(yǎng)基保存：

4℃冰箱避光保存，有效期36個(gè)月

上海蒂科生物 科研試劑一站式采購    更多產(chǎn)品  更大優(yōu)惠   歡迎您致電咨詢?。?！