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上海仁捷生物科技有限公司

植物蔗糖合成酶(SS)ELISA試劑盒案例說明

時間:2017-9-6閱讀:1268

植物蔗糖合成酶(SS)ELISA試劑盒(活性檢測)

英文名稱:Plant SS ELISA Kit
實驗類型:夾心法
檢測范圍:5 IU/ml  160 IU/ml
zui低檢測限:1.0 IU/ml,。
應用范圍:血清,、血漿,、組織勻漿,、細胞培養(yǎng)物上清或其它相關液體(本產品僅供實驗室科研及非臨床用途)

實驗原理

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被植物蔗糖合成酶(SS)捕獲抗體的包被微孔中,,依次加入標本,、標準品、HRP標記的檢測抗體,,經過溫育并*洗滌,。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的植物蔗糖合成酶(SS)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),,計算樣品濃度,。

植物蔗糖合成酶(SS)ELISA試劑盒組成

試劑盒組成96孔配置48孔配置備注
微孔酶標板8孔×12條8孔×6條 無
標準品0.3mL×6管0.3mL×6管
樣本稀釋液6mL3mL
檢測抗體-HRP10mL5mL
20×洗滌緩沖液25mL15mL按說明書進行稀釋
底物A6mL3mL
底物B6mL3mL
終止液6mL3mL
封板膜2張2張
說明書1份1份
自封袋1個1個
 

1.  標準品濃度依次為:160、80,、40,、20,、10,、5 IU/ml

2.  經過大量正常標本檢驗,標本的正常濃度值均在試劑盒提供的檢測范圍內,,實驗過程中直接取50μL樣本上樣即可,。當有部分樣本值超過zui大標準品濃度時,可用樣本稀釋液將標本進行適當稀釋后再進行實驗,。

注意事項

1. 嚴格按照規(guī)定的時間和溫度進行溫育以保證準確結果,。所有試劑都必須在使用前達到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑,。

2. 洗板不正確可以導致不準確的結果,。在加入底物前確保盡量吸干孔內液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉,。

3. 消除板底殘留的液體和手指印,,否則影響OD值。

4. 底物顯色液應呈無色或很淺的顏色,,已經變藍的底物液不能使用,。

5. 避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結果,。

6. 在儲存和溫育時避免強光直接照射。

7. 平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上,。

8. 任何反應試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強烈氣體,。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應試劑的生物活性。

9. 不能使用過期產品,。

10. 如果可能傳播疾病,,所有的樣品都應管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置,。

 

 

 

洗板方法

手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標板內的液體,;在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙,酶標板朝下用力拍幾次,;將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用,。根據需要,重復此過程數次,。

自動洗板:如果有自動洗板機,,應在熟練使用后再用到正式實驗過程中。

 

 

 

實驗結果計算

以所測標準品的OD值為橫坐標,,標準品的濃度值為縱坐標,,在坐標紙上或用相關軟件繪制標準曲線,并得到直線回歸方程,,將樣品的OD值代入方程,,計算出樣品的濃度。

Elisa試劑盒標準曲線圖

(此圖僅供參考)

 

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