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非蛋白質(zhì)巰基測(cè)試盒實(shí)驗(yàn)科研

時(shí)間:2021/5/7閱讀:1051

非蛋白質(zhì)巰基測(cè)試盒實(shí)驗(yàn)科研

 

測(cè)定意義:生物體內(nèi)巰基主要包括非蛋白質(zhì)巰基和蛋白質(zhì)巰基,。巰基化合物在體內(nèi)具有重要的解毒功能,對(duì)生物體的自我調(diào)節(jié)具有非常重要的生理意義,。

測(cè)定原理:巰基基團(tuán)與5,5’-二硫代-雙-硝基苯甲酸(DTNB)反應(yīng),,生成黃色化合物,在412nm處有最大吸收峰,。

需要的儀器,,耗材:天平、研缽,、恒溫水浴鍋,、可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板和甲醇。

非蛋白質(zhì)巰基測(cè)試盒實(shí)驗(yàn)科研

樣本處理

1.動(dòng)物,、植物組織:稱(chēng)取約 0.1g,,加入 1mL 的提取液,制備成 10%的勻漿,,10000g,,常溫離心 10min,取 上清待測(cè),。

2.細(xì)胞或細(xì)菌:按照細(xì)胞數(shù)量(10 4個(gè)):提取液體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬(wàn)細(xì)胞加入 1mL 提取液),,超聲波破碎細(xì)胞(功率 300w,超聲 3 秒,,間隔 7 秒,,總時(shí)間 3min)然后 10000g,常溫離心 10min,, 取上清置冰上待測(cè),。

3.血清(漿),培養(yǎng)液:向 0.1mL 血清(漿)或培養(yǎng)液中加入 1mL 提取液,,10000g,,常溫離心 10min,取上 清待測(cè),。
 

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