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果糖-1,6-二磷酸酶測試盒微量法操作說明

時間:2021/4/27閱讀:1135

果糖-1,6-二磷酸酶(FBP)測試盒微量法操作說明
測定原理:

FBP催化1,6二磷酸果糖和水生成6磷酸果糖和無機磷,,在反應體系中添加的磷酸葡萄糖異構酶和6-磷酸葡萄糖脫氫酶依次催化生成6-磷酸葡萄糖酸和NADPH,,340nm下測定NADPH增加速率,即可計算FBP活性,。

需要的儀器,,耗材:

分光光度計/酶標儀、恒溫水浴鍋,、臺式離心機,、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板,、研缽,、冰和蒸餾水。 測定意義:果糖-1,6二磷酸酶又稱果糖1,6二磷酸酯酶,,催化1,6二磷酸果糖和水生成6磷酸果糖和無機磷,,在糖的異生代謝和光合作用同化物蔗糖的合成中起關鍵性的作用。測定原理:

FBP催化1,6二磷酸果糖和水生成6磷酸果糖和無機磷,,在反應體系中添加的磷酸葡萄糖異構酶和6-磷酸葡萄糖脫氫酶依次催化生成6-磷酸葡萄糖酸和NADPH,,340nm下測定NADPH增加速率,即可計算FBP活性,。需要的儀器,,耗材:分光光度計/酶標儀、恒溫水浴鍋,、臺式離心機,、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板,、研缽,、冰和蒸餾水。

果糖-1,6-二磷酸酶(FBP)測試盒微量法操作說明
樣本處理
組織:按照質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g,,加入 1mL 提取液)進行冰浴勻 漿,。于 4℃,8000g,,離心 10min,,取上清,置冰上待測,。

細胞:按照細胞數(shù)量(10 4個):提取液體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬細胞加入 1mL 提取液),, 冰浴超聲波破碎細胞(功率 300w,超聲 3 秒,,間隔 7 秒,,總時間 3min),,于 4℃,8000g,,離心 10min,,取上清, 置冰上待測,。

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