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測定意義:土壤磷酸酶是一類催化土壤有機磷化合物礦化的酶,其活性的高低直接影響著土壤中有機磷的分解轉(zhuǎn)化及其生物有效性,是評價土壤磷素生物轉(zhuǎn)化方向與強度的指標,。土壤磷酸酶受到土壤碳,、氮含量、有效磷含量和pH顯著影響,。通常按照其適pH范圍,,分為堿性、中性和酸性三種類型磷酸酶,。
測定原理:堿性環(huán)境中,,S-AKP/ALP催化磷酸苯二鈉水解生成苯酚和磷酸氫二鈉,通過測定酚的生成量即可計算出S-AKP/ALP活性,。
需自備的儀器和用品: 可見分光光度計,、1mL玻璃比色皿、臺式離心機,、37℃恒溫培養(yǎng)箱,、分析天平、可調(diào)式移液器,、冰,、研缽、 蒸餾水,、乙醇和甲苯(不允許快遞),。
樣本處理
稱取風干混勻土壤約 0.1g,加入 0.05mL 甲苯(自備),,輕搖 15min,;加 0.4 mL 試劑一并且搖勻后,置于 37℃ 恒溫培養(yǎng)箱,,開始計時,,催化反應(yīng) 24h;到時后迅速加入 1mL 試劑二充分混勻,,以終止酶催化的反應(yīng),。10000rpm 室溫離心 10min,取上清液置于冰上待測
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