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測定意義:AI的適pH為3~5,。AI分為可溶性AI(S-AI)和細胞壁不溶性AI(B-AI)兩種類型,。S-AI主要存在于細胞液泡或自由空間中,,適 pH 為4.5~5.0(酸性),,通過降解液泡中蔗糖,調(diào)節(jié)液泡中蔗糖的利用和果實內(nèi)糖類的積累,。
測定原理:NI催化蔗糖分解產(chǎn)生還原糖,,進一步與3,5-二硝基水楊酸反應(yīng),生成棕紅色氨基化合物,,在510nm有特征光吸收,,在一定范圍內(nèi)510nm光吸收值與還原糖生成量成正比。通過光吸收增加速率來計算NI活性
需要的儀器,,耗材:可見分光光度計/酶標儀,、臺式離心機、水浴鍋,、可調(diào)式移液器,、微量石英比色皿/96孔板、研缽,、冰和蒸餾水,。
產(chǎn)品說明: 蔗糖轉(zhuǎn)化酶(Invertase,Ivr)催化蔗糖不可逆地分解為果糖和葡萄糖,,是高等植物蔗糖代謝關(guān)鍵酶之一,。根 據(jù)適 pH,將高等植物 Ivr 分為酸性轉(zhuǎn)化酶(AI)和中性轉(zhuǎn)化酶(NI)兩種類型,。NI 主要存在于細胞質(zhì)中,,負 責(zé)分解細胞質(zhì)中蔗糖為果糖和葡萄糖。 NI 催化蔗糖分解產(chǎn)生還原糖,,進一步與 3,5-二硝基水楊酸反應(yīng),,生成棕紅色氨基化合物,在 540nm 有特征 光吸收,,在一定范圍內(nèi) 540nm 光吸收值與還原糖生成量成正比,。通過光吸收增加速率來計算 NI 活性。
注意:實驗之前建議選擇 2-3 個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實驗,。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者 增加樣本量進行檢測,。
需自備的儀器和用品: 可見分光光度計、水浴鍋,、臺式離心機,、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿,、研缽/勻漿器,、冰、蒸餾水,。
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