本試劑僅供研究使用       目的：本試劑盒用于測定人血清,、血漿,、組織勻漿及相關液體樣本中白蛋白（Alb）的含量,。

實驗原理：

本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人白蛋白（Alb）水平,。用純化的人白蛋白（Alb）捕獲抗體包被微孔板，制成固相抗體,，往包被的微孔中依次加入人白蛋白（Alb）,，再與HRP標記的檢測抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色,。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的人白蛋白（Alb）呈正相關,。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值）,，通過標準曲線計算樣品中人白蛋白（Alb）含量。

試劑盒組成：

注：標準品濃度依次為：80,、40,、20、10,、5,、0 mg/mL.

樣本處理及要求：

1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。仔細收集上清,，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應再次離心,。

2. 血漿：應根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后,，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成,，應該再次離心,。

3. 尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。仔細收集上清,，保存過程中如有沉淀形成，應再次離心,。胸腹水,、腦脊液參照實行。

4. 細胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時,，用無菌管收集,。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清,。檢測細胞內(nèi)的成份時,，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右,。通過反復凍融,，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。仔細收集上清,。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心,。

5. 組織標本：切割標本后,，稱取重量,。加入一定量的PBS，PH7.4,。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4）,，用手工或勻漿器將標本勻漿充分,。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清,。分裝后一份待檢測,，其余冷凍備用。

6. 標本采集后盡早進行提取,，提取按相關文獻進行,，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,，可將標本放于-20℃保存,，但應避免反復凍融.

7. 不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性,。

操作步驟

• 標準品的加樣：設置標準品孔和樣本孔,，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；,。
• 加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑,，其余各步操作相同）、待測樣品孔,。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,，然后再加待測樣品10μl（樣品終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部,，盡量不觸及孔壁,，輕輕晃動混勻。
• 加酶：每孔加入酶標試劑100μl,，空白孔除外,。
• 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育60分鐘。
• 配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用,。
• 洗滌：小心揭掉封板膜,，棄去液體，甩干,，每孔加滿洗滌液,，靜置30秒后棄去，如此重復5次,，拍干,。
• 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl,，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻,，37℃避光顯色15分鐘. 
• 終止：每孔加終止液50μl,，終止反應（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。
• 測定：以空白孔調(diào)零,，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）,。 測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。

試劑盒性能：

1.樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為0.95以上,。

2.批內(nèi)變異系數(shù)與批間變異系數(shù)應分別小于10%和15% ,。

檢測范圍：                                              

2.5 mg/mL - 80 mg/mL

靈敏度：                                              

低檢測濃度小于0.1 mg/mL

保存條件及有效期：

1.試劑盒保存： 2-8℃。

2．有效期： 6個月