(GSH)谷胱甘肽含量,，小鼠酶免檢測試劑盒實驗原理：

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中小鼠谷胱甘肽（GSH）水平,。用純化的小鼠谷胱甘肽（GSH）捕獲抗體包被微孔板,，制成固相抗體,，往包被的微孔中依次加入小鼠谷胱甘肽（GSH），再與HRP標記的檢測抗體結(jié)合,，形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物,，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的小鼠谷胱甘肽（GSH）呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值）,，通過標準曲線計算樣品中小鼠谷胱甘肽（GSH）含量,。

操作步驟

• 標準品的加樣：設(shè)置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL,；,。
• 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）,、待測樣品孔,。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品終稀釋度為5倍）,。加樣將樣品加于酶標板孔底部,，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻,。
• 加酶：每孔加入酶標試劑100μl,，空白孔除外。
• 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育60分鐘,。
• 配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用,。
• 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體,，甩干,，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去,，如此重復(fù)5次，拍干,。
• 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl,，再加入顯色劑B50μl,，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘. 
• 終止：每孔加終止液50μl,，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）,。
• 測定：以空白孔調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）,。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行,。

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試劑盒性能：

1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.95以上。

2.批內(nèi)變異系數(shù)與批間變異系數(shù)應(yīng)分別小于10%和15% ,。

檢測范圍：                                              

0.25 ng/mL – 8 ng/mL,。

靈敏度：                                              

低檢測濃度小于0.1 ng/mL。

保存條件及有效期：

1.試劑盒保存： 2-8℃,。

2．有效期： 6個月