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上海仁捷生物科技有限公司

(GSH)谷胱甘肽含量,,小鼠酶免檢測試劑盒

時間:2019/12/17閱讀:1463

(GSH)谷胱甘肽含量,小鼠酶免檢測試劑盒實驗原理

本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本小鼠谷胱甘肽(GSH)水平。用純化的小鼠谷胱甘肽(GSH)捕獲抗體包被微孔板,,制成固相體,往包被的微孔中依次加入小鼠谷胱甘肽(GSH),,再與HRP標記的檢測抗體結合,,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后底物TMB顯色,。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,,并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠谷胱甘肽(GSH)呈正相關,。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),,通過標準曲線計算樣品小鼠谷胱甘肽(GSH)含量

 

操作步驟

  • 標準品的加樣:設置標準品孔和樣本孔,,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL,;
  • 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,,其余各步操作相同),、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,,然后再加待測樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍),。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,,輕輕晃動混勻,。
  • 加酶:每孔加入酶標試劑100μl,空白孔除外,。
  • 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育60分鐘,。
  • 配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用。
  • 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,,甩干,,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,,如此重復5次,,拍干。
  • 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,,再加入顯色劑B50μl,,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘. 
  • 終止:每孔加終止液50μl,,終止反應(此時藍色立轉黃色),。
  • 測定:以空白孔調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值),。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行,。

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試劑盒性能:

1.樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.95以上。

2.批內變異系數與批間變異系數應分別小于10%和15% ,。

 

檢測范圍:                                              

0.25 ng/mL – 8 ng/mL,。

 

靈敏度:                                              

低檢測濃度小于0.1 ng/mL,。

 

保存條件及有效期:

1.試劑盒保存: 2-8,。

2.有效期: 6個月

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