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小鼠補(bǔ)體蛋白4(C4)ELISA試劑盒
Mouse C4 ELISA Kit
Product Introduction
中文名稱(chēng):小鼠補(bǔ)體蛋白4(C4)ELISA試劑盒
英文簡(jiǎn)稱(chēng):Mouse C4 ELISA Kit
規(guī)格:48T/96T
檢測(cè)范圍:7.5 μg/mL – 240 μg/mL
zui低檢測(cè)限:1.0 μg/mL
檢測(cè)樣本:血清、血漿、細(xì)胞上清液、組織勻漿及相關(guān)生物液體
需自備的設(shè)備及試劑:
1.450±10nm濾光片酶標(biāo)儀(建議儀器使用前預(yù)熱)
2.高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL.
3.Eppendorf 移液器.
4.蒸餾水或去離子水.
5.脫脂棉吸水紙.
6.37℃恒溫箱.
7.100ml和1000ml量筒.
8.準(zhǔn)備若干個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品稀釋管.
試劑盒的儲(chǔ)存及有效期:
未開(kāi)封的試劑盒:所有試劑均按試劑瓶標(biāo)簽上所示保存,。請(qǐng)注意,收到試劑盒后請(qǐng)盡快將TMB 洗滌液,,終止液保存于4℃,,其他試劑保存于-20℃。
使用后的試劑盒:剩余試劑仍需按照試劑瓶標(biāo)簽所示的溫度保存,,開(kāi)封后的酶標(biāo)板要加干燥劑后密封保存于-20℃,,避免潮濕。
實(shí)驗(yàn)原理:
將目標(biāo)抗體包被于96孔微孔板中,,制成固相載體,,向微孔中分別加入標(biāo)準(zhǔn)品或標(biāo)本,其中的目標(biāo)連接于固相載體上的抗體結(jié)合,,然后加入微生物化的目標(biāo)抗體,,將未結(jié)合的生物素抗體洗凈后,加入HRP標(biāo)記和親和素,,再次*洗滌后加入TMB底物顯色,。TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的目標(biāo)呈正相關(guān),。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(O.D.值),,計(jì)算樣品濃度。
精密度:
精密度用樣品測(cè)定值的變異系數(shù)CV表示,。CV(%)=SD/mean×100
批內(nèi)差:取同批次試劑盒對(duì)低,、中、高值定值樣本進(jìn)行定量檢測(cè),,每份樣本連續(xù)測(cè)定20次,,分別計(jì)算不同濃度樣本的平均值及SD值。
批間差:選取3個(gè)不同批次的試劑盒分別對(duì)低,、中,、高值定值樣本定量測(cè)定,每個(gè)樣本使用同一試劑盒重復(fù)測(cè)定8次,,分別計(jì)算不同濃度樣本的平均值及SD值。
批內(nèi)差: CV<10% Inter-批間差: CV<13%
穩(wěn)定性:
經(jīng)測(cè)定,,試劑盒在有效期內(nèi)按推薦溫度保存,,其活性降低率小于5%。
為減小外部因素對(duì)試劑盒破壞前后檢測(cè)值的影響,,實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境條件需盡量保持一致,,尤其是實(shí)驗(yàn)室內(nèi)溫度、濕度及溫育條件,。其次由同一實(shí)驗(yàn)員來(lái)進(jìn)行操作可減少人為誤差,。
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