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針對茶葉復雜基質(zhì),,參考【GB 5009.22-2016 食品安全國家標準 食品中黃曲霉毒素B族和G族的測定】,建議實驗過程如下:
1檢測方法
1.1 第一法(液相色譜法-串聯(lián)質(zhì)譜法)
黃曲霉毒素混合標準工作液:AFB1:AFB2:AFG1:AFG2為1:0.3:1:0.3ug/mL
黃曲霉毒素混合同位素內(nèi)標工作液:AFB1:AFB2:AFG1:AFG2為0.5 ug/mL
稱取 5g試樣(根據(jù)樣品吸水性可調(diào)整)+50uL混合標準工作液+40uL混合同位素內(nèi)標工作液+84%乙腈 20mL→振蕩30min→離心 10min(離心速度 4000r/min)→取上清液4mL過PriboFast®MFC160/260固相凈化柱→取2mL凈化液+16mL吐溫PBS稀釋→將全部稀釋液通過PriboFast®AFT免疫親和柱→先用10mLPBS淋洗,,再用10mL水淋洗免疫親和柱→棄去淋洗液,,使空氣進入柱子,將水擠出柱子→用2mL甲醇洗脫,,收集洗脫液于試管中→50℃下氮氣吹至近干,,用0.5mL流動相復容→微孔濾膜(0.22μm)濾過,取續(xù)濾液上機,。
1.2 第二法(液相色譜法)
黃曲霉毒素混合標準工作液:AFB1:AFB2:AFG1:AFG2為1:0.3:1:0.3 ug/mL
稱取 5g試樣+50uL混合標準工作液+84%乙腈 20mL→振蕩30min→離心 10min(離心速度 4000r/min)→取上清液4mL過PriboFast®MFC160/260固相凈化柱→取2mL凈化液+16mL吐溫PBS稀釋→將全部稀釋液通過PriboFast®AFT免疫親和柱→先用10mLPBS淋洗,,再用10mL水淋洗免疫親和柱→棄去淋洗液,使空氣進入柱子,,將水擠出柱子→用2mL甲醇洗脫,,收集洗脫液于試管中→50℃下氮氣吹至近干,用0.5mL流動相復容→微孔濾膜(0.22μm)濾過,,取續(xù)濾液上機,。
樣品來源:檢測樣品庫中,選取紅茶、綠茶各一種有代表性的茶葉,,分別做兩種方法的本底和加標平行,。
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