液相色譜儀的主要操作步驟：

1、過(guò)濾流動(dòng)相，根據(jù)需要選擇不同的濾膜,。

2、對(duì)抽濾后的流動(dòng)相進(jìn)行超聲脫氣10-20分鐘,。

3,、打開(kāi)HPLC工作站（包括計(jì)算機(jī)軟件和色譜儀），連接好流動(dòng)相管道,，連接檢測(cè)系統(tǒng),。

4、進(jìn)入HPLC控制界面主菜單,，點(diǎn)擊manual,，進(jìn)入手動(dòng)菜單。

5,、有一段時(shí)間沒(méi)用,，或者換了新的流動(dòng)相，需要先沖洗泵和進(jìn)樣閥,。沖洗泵,，直接在泵的出水口，用針頭抽取,。沖洗進(jìn)樣閥,，需要在manual菜單下，先點(diǎn)擊purge,，再點(diǎn)擊start,，沖洗時(shí)速度不要超過(guò)10ml/min。

6,、調(diào)節(jié)流量,，初次使用新的流動(dòng)相，可以先試一下壓力,，流速越大,，壓力越大,，一般不要超過(guò)2000。點(diǎn)擊injure,，選用合適的流速,，點(diǎn)擊on，走基線,，觀察基線的情況,。

7、設(shè)計(jì)走樣方法,。點(diǎn)擊file,，選取selectusersandmethods，可以選取現(xiàn)有的各種走樣方法,。若需建立一個(gè)新的方法,，點(diǎn)擊newmethod。選取需要的配件,，包括進(jìn)樣閥,，泵，檢測(cè)器等,，根據(jù)需要而不同,。選完后，點(diǎn)擊protocol,。

一個(gè)完整的走樣方法需要包括：

a,、進(jìn)樣前的穩(wěn)流，一般2-5分鐘,；

b,、基線歸零；

c,、進(jìn)樣閥的loading-inject轉(zhuǎn)換,；

d、走樣時(shí)間,，隨不同的樣品而不同,。

8、進(jìn)樣和進(jìn)樣后操作,。選定走樣方法,，點(diǎn)擊start。進(jìn)樣,，所有的樣品均需過(guò)濾。方法走完后,，點(diǎn)擊postrun,，可記錄數(shù)據(jù)和做標(biāo)記等,。全部樣品走完后，再用上面的方法走一段基線,，洗掉剩余物,。

9、關(guān)機(jī)時(shí),，先關(guān)計(jì)算機(jī),，再關(guān)液相色譜。

10,、填寫登記本,，由負(fù)責(zé)人簽字。