液相色譜儀的主要操作步驟：

1,、過濾流動相,，根據(jù)需要選擇不同的濾膜。

2,、對抽濾后的流動相進(jìn)行超聲脫氣10-20分鐘,。

3、打開HPLC工作站（包括計算機(jī)軟件和色譜儀）,，連接好流動相管道,，連接檢測系統(tǒng)。

4,、進(jìn)入HPLC控制界面主菜單,，點(diǎn)擊manual，進(jìn)入手動菜單,。

5,、有一段時間沒用，或者換了新的流動相,，需要先沖洗泵和進(jìn)樣閥,。沖洗泵，直接在泵的出水口,，用針頭抽取,。沖洗進(jìn)樣閥，需要在manual菜單下,，先點(diǎn)擊purge,，再點(diǎn)擊start，沖洗時速度不要超過10ml/min。

6,、調(diào)節(jié)流量,，初次使用新的流動相，可以先試一下壓力,，流速越大,，壓力越大，一般不要超過2000,。點(diǎn)擊injure,，選用合適的流速，點(diǎn)擊on,，走基線，觀察基線的情況,。

7,、設(shè)計走樣方法。點(diǎn)擊file,，選取selectusersandmethods,，可以選取現(xiàn)有的各種走樣方法。若需建立一個新的方法,，點(diǎn)擊newmethod,。選取需要的配件，包括進(jìn)樣閥,，泵,，檢測器等，根據(jù)需要而不同,。選完后,，點(diǎn)擊protocol。

一個完整的走樣方法需要包括：

a,、進(jìn)樣前的穩(wěn)流,，一般2-5分鐘；

b,、基線歸零,；

c、進(jìn)樣閥的loading-inject轉(zhuǎn)換,；

d,、走樣時間，隨不同的樣品而不同,。

8,、進(jìn)樣和進(jìn)樣后操作。選定走樣方法，點(diǎn)擊start,。進(jìn)樣,，所有的樣品均需過濾。方法走完后,，點(diǎn)擊postrun,，可記錄數(shù)據(jù)和做標(biāo)記等。全部樣品走完后,，再用上面的方法走一段基線,，洗掉剩余物。

9,、關(guān)機(jī)時,，先關(guān)計算機(jī)，再關(guān)液相色譜,。

10,、填寫登記本，由負(fù)責(zé)人簽字,。