液相色譜儀的主要操作步驟：

1、過濾流動相,，根據(jù)需要選擇不同的濾膜,。

2、對抽濾后的流動相進行超聲脫氣10-20分鐘,。

3,、打開HPLC工作站（包括計算機軟件和色譜儀），連接好流動相管道,，連接檢測系統(tǒng),。

4、進入HPLC控制界面主菜單,，點擊manual,，進入手動菜單。

5,、有一段時間沒用,，或者換了新的流動相,，需要先沖洗泵和進樣閥。沖洗泵,，直接在泵的出水口,，用針頭抽取。沖洗進樣閥,，需要在manual菜單下,，先點擊purge，再點擊start,，沖洗時速度不要超過10ml/min,。

6、調(diào)節(jié)流量,，初次使用新的流動相,，可以先試一下壓力，流速越大,，壓力越大,，一般不要超過2000。點擊injure,，選用合適的流速,，點擊on，走基線,，觀察基線的情況,。

7、設(shè)計走樣方法,。點擊file,，選取selectusersandmethods，可以選取現(xiàn)有的各種走樣方法,。若需建立一個新的方法,，點擊newmethod。選取需要的配件,，包括進樣閥,，泵，檢測器等,，根據(jù)需要而不同。選完后,，點擊protocol,。

一個完整的走樣方法需要包括：

a、進樣前的穩(wěn)流,，一般2-5分鐘,；

b,、基線歸零；

c,、進樣閥的loading-inject轉(zhuǎn)換,；

d、走樣時間,，隨不同的樣品而不同,。

8、進樣和進樣后操作,。選定走樣方法,，點擊start。進樣,，所有的樣品均需過濾,。方法走完后，點擊postrun,，可記錄數(shù)據(jù)和做標記等,。全部樣品走完后，再用上面的方法走一段基線,，洗掉剩余物,。

9、關(guān)機時,，先關(guān)計算機,，再關(guān)液相色譜。

10,、填寫登記本,，由負責人簽字。