明膠藥用空心膠囊鉻檢測方法指導原則

適應范圍：

本指導原則適用于2012年明膠藥用空心膠囊殼中鉻檢測的應急檢驗,。

1,、檢驗樣品：

膠囊劑（由明膠空心膠囊殼裝載的膠囊）。

2,、檢驗項目：

    明膠空心膠囊中的鉻,。

3、檢驗方法：

《中國藥典》2010年版（二部）明膠空心膠囊項下鉻檢查項（P1204）,、附錄IV D 原子吸收分光光度法（附錄24）,、附錄I E 膠囊劑裝量差異項（附錄8）。

4,、檢驗所需檢品量的參考值：

5、儀器

5.1 原子吸收分光光度計（含石墨爐原子化裝置）

5.2電子天平

5.3 微波消解儀

5.4 電熱板或其他趕酸設(shè)備,，如：恒溫消解儀,、趕酸器等。

6,、試劑

6.1 硝酸（優(yōu)級純）

6.2 鉻單元素標準溶液（1000µg/ml,，國家標準物質(zhì)）

7、空心膠囊殼的制備：

傾出膠囊劑的內(nèi)容物,，膠囊殼用棉棒或小刷試凈（不得損壞囊殼）,，放置，待用,。

8,、膠囊劑中明膠空心膠囊殼中總鉻測定方法：

8.1鉻標準貯備液的制備：取鉻單元素標準溶液（1000µg/ml），用2%硝酸稀釋制成每1ml含鉻1.0μg的鉻標準貯備液,。

8.2標準溶液的制備：分別精密量取鉻標準貯備液適量,，用2%硝酸溶液稀釋制成每1ml含鉻0~80ng的對照品溶液。臨用時現(xiàn)配,。

8.3供試品溶液的制備：精密稱取本品0.5g,，置聚四氟乙烯消解罐內(nèi)，加硝酸5~10ml,，混勻,，浸泡過夜，蓋上內(nèi)蓋,，旋緊外套,，置適宜的微波消解。消解*后,，取消解內(nèi)罐置電熱板上緩緩加熱至紅棕色蒸汽揮盡并近干,，用2%硝酸轉(zhuǎn)移至50ml量瓶中，并加2%硝酸稀釋至刻度,，搖勻,，作為供試品溶液；同法制備試劑空白溶液,，作為空白校正,。

8.4 測定：  取供試品溶液與對照品溶液適量，以石墨爐為原子化器,，照原子吸收分光光度法（《中國藥典》2010年版（二部）附錄IV D法）,，在357.9nm的波長處測定，計算,，即得,。

9、方法驗證：

9.1 線性：制備含鉻的對照品溶液至少5份,，濃度依次遞增,，濃度吸收值應在0.8以下，保證具有較好的線性范圍,，相關(guān)系數(shù)（r）≥0.99,。

9.2 準確性：應進行整個實驗過程的（包括前處理）方法學回收率驗證，暫定回收率應為80%-120%的范圍內(nèi),。每次測定需進行隨行回收試驗,。

9.3 重復性

取限度濃度的標準品溶液重復測定5次，吸收度（測定值）的變化范圍（RSD）不得過5%,。

9.4 定量限

本方法定量限應不低于0.5mg/kg,。

10,、注意事項：

10.1消解：樣品前處理是試驗中的關(guān)鍵步驟，既要保證消解*,，又要保證消解過程樣品中的鉻不損失,，因此試驗中建議加入10ml硝酸（優(yōu)級純），并需要浸泡過夜后消解,。參考消解程序為：5min由室溫升至120℃,，維持3min；6min由120℃升至150℃,，維持2min,；6min由150℃升至180℃，維持20min,。

10.2為避免玻璃容器的干擾,，試驗中宜采用塑料容量瓶（聚丙烯材質(zhì)）定容。

10.3不同原子吸收儀試驗參數(shù)可能不同,，可根據(jù)原子吸收儀說明書中推薦程序設(shè)    定測定參數(shù)（參考石墨爐升溫程序如下：5s升溫至100℃,，保持10s；5s升溫至500℃,，保持10s,；0s升溫至2100℃，保持3s,；0s升溫至2200℃,，保持2s）

10.4含鈦白粉的膠囊殼（不透明膠囊）建議在微波消解時，樣品中除加硝酸外可另加0.5ml氫氟酸,，其他同供試品溶液制備,。

10.5實驗用水：應采用純化水，儲藏水的容器宜用聚丙烯塑料材料制成,，不宜選用玻璃容器長期儲存,。

10.6 試劑應采用優(yōu)級純及以上級別試劑。

10.7試驗中所用容器及器皿均需在每次使用前用鹽酸溶液（濃鹽酸：水/1:1）浸泡1h,，再用硝酸溶液（濃硝酸：水/1:1）浸泡1h,，再用純化水沖洗干凈后使用。微波消解容器應采用儀器清洗程序清洗,，不得采用鉻酸清洗液洗滌容器,。

10.8可供選擇的鉻元素標準溶液（1000µg/mL）由國家有色金屬及電子材料分析測試中心提供（：；）,；也可以由中國計量科學研究院提供（：-4703）,。鉻對照貯備溶液應密封，冷暗處保存,。

10.9 結(jié)果判斷：標準規(guī)定不得過百萬分之二（2mg/kg）,。由于微量測定,，結(jié)果的偏差會較大，一般兩份樣品的相對偏差≤10%,，取平均值即可,。

10.10 樣品檢測應嚴格遵守《中國藥典》2010年版（二部）“明膠空心膠囊”鉻項下方法試驗,，如因試驗需要改變樣品前處理方法及檢測波長,，應按照實驗室有關(guān)質(zhì)量管理程序（偏離）進行。

10.11若試劑空白溶液測定值過高（宜不超過標準曲線濃度點吸光度值的50%）,，應換用空白干擾小的溶液重新試驗,。

10.12 注意試驗所需的所有儀器均應在計量檢定合格效期內(nèi)。

10.13若供試品溶液濃度過高,，可稀釋到標準曲線范圍內(nèi)進行測定,。

10.14 由于硬、軟膠囊殼中含有不同比例的甘油（軟膠囊比例較高,，甘油：明膠比例可達1:2）,，在進行微波消解時,，甘油可與硝酸產(chǎn)生反應，容易爆罐,，請注意消解時的安全監(jiān)控，盡量在前處理時預消解,。