<培養(yǎng)細胞>
培養(yǎng)細胞總是會讓科研小白茶飯不思,,擔(dān)驚受怕,,即使大好春光出去陪美眉或者小哥哥,也會牽腸掛肚,,心不在焉,。
萬一污染了又要看到師兄師姐鄙視的目光,,嫌棄的嘴角,還有因為污染造成其他戰(zhàn)友的驚恐不安,,想想都怕怕,。
師姐A:師妹!??!讓你養(yǎng)著玩的細胞又污染了。
師姐B:納尼,?,!
師姐C(火速趕往案發(fā)現(xiàn)場):我的心肝寶貝細胞你還好么?
師兄A:天?。,。?!并致電女票:“親愛的,,晚上不能陪你了,新來的師妹細胞又污染了,,我又要給培養(yǎng)箱滅菌了”,。
師妹:我是罪人,好丟臉,。像我這樣的小白如何避免細胞污染呢?
“師妹過來,,師兄手把手教你,,如何預(yù)防細胞污染。” 想當年師兄就是靠養(yǎng)細胞培養(yǎng)起來的重度潔癖,。
常規(guī)操作不再贅述,,主要安利以下內(nèi)容:
1. 仔細閱讀所在實驗室的細胞室綜合管理制度,嚴格遵守制度,。
2. 細胞室室內(nèi)滅菌可以交叉進行,,熏蒸、臭氧,、紫外,、新潔爾滅。
3. 根據(jù)細胞室空間,,限制同時進入人數(shù),。
4. 超凈工作臺使用前后,紫外燈照射滅菌,。使用前,、后需用酒精棉球擦拭工作區(qū)消毒(小竅門:超凈臺使用完畢后,,可以用酒精噴灑桌面,再用抽紙擦干凈,,比用酒精棉球干凈多嘍,!使用前不建議這種方法擦拭)。物品放入超凈臺前均應(yīng)酒精噴灑消毒,,超凈臺內(nèi)嚴禁堆放過多物品,,以免影響風(fēng)路平衡。
5. 水浴鍋使用完畢后及時將水倒掉,,并保持鍋內(nèi)干燥,。常用水浴鍋時,每周將水浴鍋中的水至少煮沸一次,,以防細菌滋生,。
6. 從培養(yǎng)箱取放細胞前,用酒精清潔雙手(或手套),,盡量縮短開門時間和減少開門次數(shù),。培養(yǎng)瓶放入培養(yǎng)箱前,用酒精消毒表面,,并稍等至酒精揮發(fā)后再放入,,以免培養(yǎng)箱內(nèi)滯留過多乙醇蒸氣。
7. 培養(yǎng)箱用水每周更換一次,,更換前托盤用酒精擦拭,、紫外燈照射30分鐘殺菌。
8. 滅完菌槍頭,,烘箱烘干后存放,,保質(zhì)期1周。逾期需重新滅菌使用,。
9. 培養(yǎng)液,、胰酶、PBS等試劑盡量不和別人共用,,應(yīng)單獨分裝使用,,以免交叉污染,也便污染后自查原因,。
10.在使用0.22μm的微孔濾膜過濾自配溶液時,,注意無菌操作規(guī)范,以防濾液污染,。特殊情況可檢菌安全后使用,。
11.除特殊要求外,建議培養(yǎng)基中添加雙抗,,算是送給細胞的守護神,。
12.防護服,、口罩、手套缺一不可,。隔壁細胞室負責(zé)人是韓國回來的博士,,讓學(xué)生只戴手套操作,于是經(jīng)常聽他們說細胞掛了,。
13.操作前,,準備好所有實驗所需物品,以減少走動,;物品需有序擺放在超凈臺觸手可及的地方,,同時空留足夠操作空間。
14.操作時,,試劑不用盡量及時蓋上蓋子,,移至操作區(qū)外圍,盡量不要從開口容器上經(jīng)過,。
15.使用移液槍時,,將容器傾斜以便于移液,切勿將槍桿碰觸瓶口及內(nèi)壁,。一旦發(fā)生倒吸情況,,要及時用酒精棉球擦拭,以免液體殘留導(dǎo)致細菌滋生,。
16.先取試劑,、耗材,再取移液槍,、安槍頭,。很多人習(xí)慣先安槍頭,然后去拿試劑,、耗材,,殊不知無意間槍頭已經(jīng)觸碰其他地方導(dǎo)致污染,。
17.向廢液缸打廢液時,,需輕柔,以免造成水花四濺,,污染槍頭,、槍體。實驗結(jié)束,,及時倒掉廢液缸垃圾,,沖洗之后噴灑酒精,放入超凈臺紫外照射殺菌,。
18.培養(yǎng)基滴在桌面時要及時用酒精棉球擦拭,,切記不要等實驗做完再處理,。因為那樣,你的臺面上就會留下一個印記,,對于強迫癥的人來說,,不!能,!接,!受!?。,。?/p>
19.凍存細胞時凍存管蓋子需擰緊,。復(fù)蘇細胞時,,從液氮罐取出凍存管,輕擰蓋子,,以確認蓋子是否擰緊,。鑷子夾住凍存管蓋子與管體交界處,在37度水浴鍋中快速解凍,,水面不可超過凍存管蓋沿,;不建議直接扔進水中,以免水滲入造成污染,。
20.一旦污染,,及時處理,不到不得已不建議施救,;查找原因,,防止再犯。
總的來說,,防患未然比亡羊補牢強得多,。操作過程中對于模糊不清的,寧愿認為是有菌的棄掉,,也不要心存僥幸,!
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